酶的固定化技术.pdfVIP

20 11年第3期 内蒙古石油化工 99 酶 的 固 定 化 技 术 吴鹏超1，李 华2 ( 1．内蒙古化工职业学院， 内蒙古呼和浩特0100 11，2 ．中州大学，河南郑州450033) 摘要：酶是一种高活性的生物催化剂，虽然其在酶生物燃料 电池和传感器等方面的应用十分广 泛，但酶在工业上的广泛应用一直受到很多限制，因为酶在水溶液中一般很不稳定 。酶的固定化技术与 合理设计 、酶生物传感器 的结构仍然是酶生物燃料电池和传感器领域今后研究的重要方向。如果通过酶 的固定化技术的改进能使酶在使用过程中提高其稳定性，保持催化活性将使酶生物传感器得到更大的 发展 。 关键词：酶；固定化酶；酶活性 中图分类号：TQ426 ．97 文献标识码：A 文章编号：1006- - 798 1( 2011) 03一0099一03 酶修饰 电极在酶生物燃料 电池和传感器等方面 化再生 。根据吸 附剂的特点吸附法可分为两种：物理 的应用十分广泛。1967年Updi ke等[ 1] 实现 了酶的固 吸附和离子交换吸附。常用载体有无机载体、有机载 定化技术研制成酶电极，这被认为是世界上第一个 体、有机大分子物质等。酶和载体间的作用力可 以是 生物传感器。此后，酶电极 的研究相当活跃酶作为一 氢键、疏水键、耳一 电子亲和力、离子键合力等 。某些 种生物催化剂具有高效、高选择性、催化反应条件温 电极材料的表面存在着一些官能团和细微 的洞孔， 和、无污染等诸多特点。 它们可 以有效地吸附酶分子，但这种吸附是不可逆 其 中由于游离酶直接再生可控性强，易于放大 的，所得 电极的稳定性较差，酶和载体 的结合力较 并且可以连续操作，所以具有很明显的优 势。然而， 弱，酶易受外界因素的影 响而容易失活或脱落。 酶的价格昂贵 ，游离酶难以回收利用，其不稳定性和 徐坚等[4 ] 以柱状假丝酵母脂肪酶和猪胰脂肪酶 易变性等缺点，使它们难 以在工业中得到更为广泛 为研究对象，选取了8种亲疏水性不同的膜材料作 的应用。此外 ，分离和提纯酶以及它们的一次性使用 为固定化载体，用吸附法制备了固定化脂肪酶膜 。其 也增加了其作为催化剂的成本。因此，固定化酶的概 中聚四氟乙烯膜，固定化酶活力达到游离态酶的80 ． 念和技术得以提出和发展并使上述的缺点得以克 8 ％。Az ami an等r 5] 人采用吸附的方法将S NTs 固 服。游离酶[ 2L一般溶于水，在有机溶剂中聚集成团， 定在玻碳 电极上，制成GOD—S NTs 修饰的玻碳 本身不稳定，使用后也不宜分离，而若将酶固定在载 电极。用GOD—SwNTs 修饰的玻碳 电极的伏安电 体上有利于底物分子的扩散，可扩大酶与底物 的接 流是裸玻碳电极的十倍之大 ，证实了S NTs 能极 触面积，提高酶的热力学稳定性，有利于在有机溶剂 大地促进 电子传输 。金纳米颗粒也被用于酶的固定 中的反应，并可以很方便地分离和重复使用，对提高 化 中。由于其能和酶 中的胺基和半胱氨酸残基紧密 酶的利用效率，延长使用时间具有重要意义。 结合；通常将蛋白质直接吸附在裸金表面，会变性和 酶的固定化是将酶束缚于特殊的载体 ，使它与 失去生物活性。但是 ，要是将蛋白质吸附在金纳米颗 整体相分隔，但仍能与底物进行分子交换 ，这种固定 粒上，就有可能保持蛋白质的生物活性 。据于此， 化的酶既具有酶的催化特性、可回收、反复使用等特 Er