Livin和bcl-2 p53基因在宫颈癌组织中表达相关性的初步研究.DOCVIP

临床医学论文-Livin和bcl-2 p53基因在宫颈癌组织中表达相关性的初步研究 ??????????????????????????? 作者：李爱竹，肖德乾，黄红梅，林琼燕，方林彬 【摘要】? 目的：探讨新的凋亡抑制基因livin在宫颈癌组织中的表达，及其与bc1-2和p53表达的相关性。方法：应用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接法(SP法)，检测livin、bcl-2、p53基因在lO例正常宫颈组织及57例宫颈癌组织中的表达。结果：Livin基因在正常宫颈组织中不表达，57例宫颈癌组织中,40例表达阳性，占70.1％。Livin基因表达阳性率与宫颈癌的病理分级和临床分期有关。宫颈癌组织中p53蛋白表达阳性、阴性者中，livin基因表达阳性率分别为76．7％(33／43)、21.4%(3/14)，两者比较，差异有统计学意义(P0.05)；bcl-2蛋白表达阳性、阴性者中，livin基因表达阳性率分别为87.8％(36／41)、25%(4/16)，两者比较，差异有统计学意义(P0.05)。结论：Livin基因的异常表达而引起的细胞凋亡抑制，在宫颈癌的发生中起一定作用,其表达与宫颈癌组织中p53、bc1-2蛋白的异常表达密切相关。 【关键词】? bcl-2； p53； 宫颈肿瘤； 免疫组织化学 　　Livin(又称KIAP，ML-IAP)是一种新发现的IAP(凋亡抑制蛋白)家族成员，其表达与肿瘤的发生、发展密切相关。livin基因在正常组织中不表达，而在许多被研究的肿瘤组织中呈阳性表达，因此为肿瘤的诊断和治疗提供了新的靶点。本研究着重探讨新的细胞凋亡抑制基因livin在宫颈癌组织中的表达及其与bcl-2和p53表达的关系。 　　1? 资料与方法 　　1.1? 资料：选择我中心1999年至2005年间经病理检查证实的宫颈癌患者57例，取其放射治疗前的活组织检查标本，用4％甲醛固定，石蜡包埋，连续切片。留1张行苏木素伊红(HE)染色复诊。57例宫颈癌患者均为鳞癌，年龄31～70岁，平均52.3岁。病理分级：C1级7例，C2级23例，C3级27例。根据1985年再次修订后的国际妇产科联盟(FLGO)提出的分期标准进行临床分期：Ⅱb期14例，Ⅲa 期1例，Ⅲb 期42例。肿瘤生长类型：菜花型31例，结节型19例，溃疡型5例，混合型2例。另取l0例正常宫颈组织作为对照。 　　表1? 宫颈癌患者临床病理及bcl-2、p53蛋白表达与livin基因表达关系（略） 　　1.2? 方法：采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接(SP)免疫组织化学方法。一抗为鼠抗人livin单克隆抗体(Imgenex公司生产，可检测livin-α和livin-β，购于美,1:50)、bcl-2兔抗人多克隆抗体(sc-492)、P53鼠抗人单克隆抗体(D0-1，sc-126)为美国Ssnta Cruz公司产品；SP试剂盒为美国Zymed公司产品，一抗工作浓度均为1:30。实验步骤按试剂盒说明书进行。将已知的乳腺癌切片作为阳性对照，用磷酸盐缓冲液代替一抗，作为对照。 　　1.3? 结果判定：在组织切片中显示胞核或胞浆染为淡黄至黄棕色者为阳性细胞标志。将阳性细胞按其数量及显色强度分为3级：表达弱阳性(+)，即阳性细胞数10％，显色强度为淡黄色或仅个别细胞呈黄至棕黄色染色；表达强阳性(+++)，即阳性细胞数60％，多数细胞呈黄至棕黄色染色；表达中度阳性(++)，即阳性细胞数及显色强度介于弱阳性与强阳性之间。凡显色强度与背景无明显差别者为阴性。 　　1.4? 统计学处理：采用X2检验。 　　2? 结果 　　2.1? 宫颈癌组织中livin基因的表达：Livin基因表达阳性染色主要定位于肿瘤细胞胞浆中，为粗细不一的棕黄色颗粒。正常宫颈组织中未见Livin基因表达，而57例浸润癌中40例livin基因表达阳性，占70.1％。 　　2.2? 宫颈癌组织中livin基因表达与临床病理的关系：Livin基因阳性表达与患者年龄、肿瘤生长类型无关 (P 0.05); livin基因的表达随宫颈癌临床分期的增加而增高,两者比较有统计学意义(P0.05); 宫颈癌细胞分化程度越低, livin基因阳性表达率越高, 两者比较有统计学意义(P0.05)见表1。 　　2.3? 宫颈癌组织中livin基因表达与bcl-2、p53蛋白表达的关系：bcl-2蛋白阳性产物主要定位于细胞浆中。57例宫颈癌组织中41例呈阳性表达，占71.9％。41例bcl-2蛋白阳性表达者中，36例livin基因表达阳性，占87.8％ ，16例bcl-2蛋白阴性表达者中4例livin基因表达阳性，两者比较具有统计学意义(P0.05)。p53蛋白免疫反应产物积聚在肿瘤细胞核中。宫颈癌组织中livin基因表达与p53