尿激酶受体检测方法的建立及其临床应用.pdfVIP

今中文摘要 研究生 高维强 导师 阮长耿教授巾 尿激酶受体检测方法的建立及其临床应用 摘 要 研究生:高维强 导 师:阮长耿教授 尿激酶受体 (uPAR)是 1985年Vassalli等首先在人单核细胞表 的一个单链膜糖蛋白。近年的研究表明，uPAR具有多种功能。 它在肿瘤细胞表面过表达，通过降解细胞外基质成分、信号传递以及 介导细胞的粘附与迁移，在肿瘤细胞的生长、浸润和转移中起着重要 的作用。此外，它还可能参与炎症、血栓形成等病理过程。以上已成 为当前医学研究中的一个新的热点沙 细胞表面的uPAR可以释放到血液循环中，成为可溶性uPAR (suPAR)。我们利用两株抗人uPAR的单克隆抗体，在国内首先建立 了suPAR的双抗体夹心免疫放射分析 (IRMA)o该方法敏感、特异， 重复性好，准确性较高，最小可测值为0.70u妙，抗与重组人uPAR (rhsuPAR)的亲和常数为4.75X109Llmol，平均回收率为 101.3%. 批内及批间CV分别为((6.40土2.57)%和(10.48士2.65)%0测定62例正 常人血清suPAR水平为 ((2.71士1.12)u叭，21例正常人血浆suPAR 水平为(1.7310.96)u叭。正常人suPAR水平在不同年龄和性别之间 差异不显著。于 为了解肿瘤患者体内suPAR水平变化的临床意义，应用以上方 法，我们检测了30例良性肿瘤患者与124例恶性肿瘤患者血清suPAR 水平，探讨恶性肿瘤患者血清suPAR水平与肿瘤浸润转移和治疗的关 系。令果显示，“·恶性肿瘤患者血清suPAR水平分别为(3.7111.69) u叭和((5.82+2.27)u叭，较正常对照明显增高(P0.01和P0.001), 而恶性肿瘤患者又高于良性肿瘤患者 (P0.001).恶性肿瘤病人中， 伴有淋巴结浸润和远处转移的患者血清suPAR水平较无浸润转移的患 者要高。另外，经手术治疗的恶性肿瘤患者血清suPAR水平比未经手 术治疗者低。因此，血清suPAR水平对肿瘤患者的病情监测和疗效判 a中文摘要 研究生 高维强 导师 阮长耿教授巾 断有较高的临床价值，suPAR有可能成为一种新的肿瘤标记物。 同时检测10例炎性患者胸水和26例恶性肿瘤患者胸水suPAR水 平发现，良、恶性胸水suPAR水平分别为((2.6411.05)u妙和(4.36 士2.12)u叭，均高于正常对照(P0.05和P0.001)，而恶性胸水suPAR 水平又高于炎性胸水 (P0.05)。此外，恶性胸水 suPAR水平还显示 出与患者预后相关。因此，检测suPAR水平有助于鉴别胸水的良、恶 性及判断肿瘤患者的预后。 阵发性睡眠性血红蛋白尿症 (PNH)是一种由体细胞突变引起异 常造血干细胞克隆性增殖的疾病。临床上诊断该病常用传统的酸化溶 血试验 (Ham试验)和糖水试验。近年来川门发现PNH患者血细胞 表面完全或部分缺乏所有需以糖基化磷脂酞肌醇 (GPI)锚定在膜表 面的蛋白，如衰变加速因子 (DAF,CD55)、同源限制因子 (HRF) 和膜反应溶解抑制物 (MIRL,CD59)等。uPAR需要以GPI锚定在 血细胞 (粒细胳单核细胞等)表面，因而PNH患者血细胞缺乏uPAR 的表达。我们利用流式细胞仪检测20例PNH患者粒细胞表面uPAR, CD55,CD59的表达水平，并与21例正常人、59例其他贫血 (18例 自身免疫溶血性贫血、6例其他溶血性贫血以及26例慢性再生障碍性 贫血、9例缺铁性贫血)比较。同时采用免疫放射分析 (IRMA)测定 PNH患者血浆suPAR的水平，以期观察PNH患者粒细胞表面uPAR 和血浆suPAR水平的改变，探索uPAR的检测在PNH诊断中的意义。 结果表明，20例PNH患者中uPAR、CD55,CD59表达水平显著降 低，并与正常人uPAR表达下限不重叠。在PNH患者中还存在FCM 的峰型异常 (双峰和/或峰拖尾)。而57例其他贫血患者中性粒细胞表 面uPAR的表达水平无改变。PNH患者血浆suPAR水平为((4.04士2.47) ug/L，明显高于正常人血浆suPAR的水平 (P0.01).PNH患者血浆 suPAR水平与粒细