BDNF及其受体在癫痫后认知功能损伤大鼠海马中表达变化.pdf

中文摘要 BD盱及其受体在癫瘸后认知功能损伤 大鼠海马中的表达变化 摘 要 目的：癫痫(印il印sy’EP)是由多种原因引起的慢性脑功 能障碍综合症，是神经系统常见的疾病。很多癫痫患者除临 床痫性发作症状外，常伴有学习记忆减退，成为影响患者生 存质量的一个重要原因。有学者研究认为癫痫患者30％qO％ factor，B烈师)对于多种神经元的发生和存活都 neur0昀pll：ic 有促进作用，能抵抗伤害性刺激、促使神经元损伤后的再生、 调节突触与神经元的可塑性。近来的动物实验表明脑源性神 经营养因子直接参与学习记忆过程，对于改善阿尔茨海默 病、血管性痴呆等多种疾病的认知功能障碍有一定效果。但 迄今其与癫痫后认知功能损伤关系的研究未见报道。我们利 印ileptic哪，SE)和慢性癫痫(chmrlicepil印sy，CEP)两种动物模 w￡Iter 试验(Morrisma孺test，M舢、交替电刺激Y迷宫试 elec啡stimulus 验(alt哪撕ve 验(inclined pl觚ete瓯IPT)、悬吊试验(ovcrh柚西ngte瓯 Om)、逆转录多聚酶链反应(reve雠缸锄scriptionpolyme郴e chain 类型癫痫对大鼠学习记忆能力的影响，以及BDNF及其受体 中文摘要 痫患者认知功能损害的机制提供线索。 方法 1造模 209，经过两次交替电刺激Y迷宫试验筛选，合格者进行模 型制备。筛选后获得合格动物75只，将实验动物随机分成 四组：sE组和SE对照组(C∞的lI)、CEP组和CEP对照组 (Co曲同lI)。制模过程中大鼠出现死亡或不符合模型要求者， 予以剔除并随机补充，以保证每组动物15只。 1．1SE模型：SD大鼠30只，随机分成2组，每组15只。 后每lO分钟注射lOmg／】吨，直至诱发大鼠急性SE发作。对 照组同时腹腔注射同等容量的生理盐水。 1．2CEP模型：分组同SE模型。按35 m眺g腹腔注射PTz 4～ 溶液，每48小时一次，直到连续三次注射期间均有胝ine 5级以上的惊厥发作。对照组同时腹腔注射同等容量的生理 盐水。 2认知功能及运动能力检测 造模成功后24小时、30天两个时间点，分组进行认知 功能及运动能力检测。先进行交替电刺激Y迷宫试验和 Morris水迷宫试验，后进行悬吊试验和斜板试验。 3脑电图 认知功能及运动能力检测完毕后进行脑电图扫描，将正 常大鼠麻醉后固定于脑立体定位仪上，放置双侧皮质和双侧 海马电极，待大鼠清醒后，按上述分组制作模型，描记脑电 图。 中文摘要 4逆转录多聚酶链反应 认知功能及运动能力检测完毕后迅速分离海马。经提取 海马总鼬呵A、逆转录合成cDNA、引物扩增后，扩增产物在 琼脂糖凝胶上电泳，用UVP凝胶图像成像系统扫描定量并 摄像电泳条带的灰度。凝胶图像分析系统分析结果。 5免疫组织化学染色 麻醉状态下经左心室行主动脉插管，4％多聚甲醛溶液 进行灌注，取脑固定，常规包埋，标本冠状位石蜡切片。经 抗原修复、羊血清封闭后，分别加BDNF和TrkB多克隆抗 体，再经二抗、三抗孵育，DAB显色后置显微镜下观察记录。 结果 ． 1癫痫行为学 各模型组大鼠均出现不同程度的痫性发作，造模成功。 2认知功能及运动能力检测 2．1Morris水迷宫试验： 2．1．1定位航行试验①lacenavigati∞test，PNrI) 24小时各时段逃避潜伏期均有明显延长，差异有显著性 (PO．05)；而造模后30天各时段逃避潜伏期无明显差异 (PO．05)。 24小时逃避潜伏期在前3天的6个时段有明显延长，差异有 造模后30天各时段逃避潜伏期亦无明显差异(P0．05)。 2．1．2空间探索试验