拟除虫菊酯对棉铃虫和大鼠海马神经元钠钾电流影响.pdfVIP

南开大学硕士研究生毕业(学位)论文 中英文摘要 摘要 论文用全细胞膜片钳技术在急性分离培养的棉铃虫中枢神经细胞和海马锥 体神经元上，分别观察三氟氯氰菊酯对棉铃虫和海马神经细胞通道电流的作用影 响。旨在研究杀虫剂对棉铃虫中枢神经细胞钾通道有无作用以及作用机制，进一 步研究棉铃虫抗性形成机制；研究杀虫剂对哺乳动物神经细胞钠钾通道的毒性影 响及作用方式，探讨杀虫剂对害虫和哺乳动物神经细胞毒性的差异，以期为设计 具有新靶标和对害虫高效、对哺乳动物低毒的有效药物提供理论依据。主要实验 结果如下： 1．细胞培养：分离得到的棉铃虫和海马神经细胞，胞体明亮，有较长突起， 细胞表面光洁，有较强的光晕，立体感强，贴壁良好。 2．三氟氯氰菊酯对棉铃虫神经细胞瞬间外向钾电流的影响：结果表明，加 mmol，L)作用后，激活电压 药前通道在-40mv左右激活，三氟氯氰菊酯(10’5 mv，通道在．50mV左右激活，电流幅值未有明显变化； 向负电位方向移动约10 加药前后激活曲线的vh、k值和形状无明显改变；失活曲线左移且vh变化明显， 763、8．123±O．672和-59．299±1．46、 给药前后的vh和k分别为．48．472±0 lO．573±1．36。但k值没有明显变化。 3．三氟氯氰菊酯对棉铃虫神经细胞延迟整流钾电流的影响：结果表明，药 物作用前分别有81％和39％的细胞的通道在．30mV和_40mV激活(舻21)。 min后，分别有63％和38％细胞的通道在 三氟氯氰菊酯(10’5mmol／L)作用15 _40 mv和．50mV激活(n=8)；作用1min后电流幅值明显降低，抑制率达到 了37．7％(胛=19)；加药后激活曲线明显左移且％值变化显著，给药前后的vh 和k分别为11．4±2．32、20．5±2．19和2．45±o．878、24．9±1．15。 4．三氟氯氰菊酯对大鼠海马锥体神经元钾电流的作用影响：结果表明，低 浓度(100IIlInol／L)和高浓度(104mmol／L)三氟氯氰菊酯对瞬间外向钾通道 分别有激活和抑制作用，但它们对峰电流的改变没有显著性差异。高浓度三氟氯 氰菊酯使通道激活曲线稍微右移，Vh和k改变不明显；但是能够使通道失活曲 mV、7．2840 线明显左移，给药前和给药后10minvh和k分别为一70．711±0．445 ±O．403和-90398±0．839mV、11．602±O．658，半数激活电压vh改变显著。但 试验中发现药物对延迟整流钾电流峰值没有影响。 5．高浓度三氟氯氰菊酯对大鼠海马神经元钠通道的影响：高浓度三氟氯氰 菊酯(10。3mmol／L)作用后，海马锥体神经元钠电流显著降低，最大抑制率为 32．6％。钠通道的激活电位在．70mV左右，药物作用前后改变不大。峰值电压左 移大约10mv。激活曲线的vh向负方向移动8mV左右。但是失活曲线的vh向 南开大学硕士研究生毕业(学位)论文 中英文摘要 负方向移动17mV左右。但七值没有明显变化。 6．低浓度三氟氯氰菊酯对大鼠海马神经元钠通道的影响：低浓度三氟氯氰 菊酯(104mmol／L)作用后，海马锥体神经元钠电流峰值增加明显，最大增加率 为26．6％。钠通道的激活电位向超极化方向移动10mv左右。峰值电压移动20 mV左右。 化显著。失活曲线的Vh向负方向移动8 实验结果表明：三氟氯氰菊酯促进了棉铃虫神经细胞瞬间外向钾通道的失 活。显著抑制延迟整流钾电流电流峰值，棉铃虫中枢神经细胞钾通道也是拟除虫 菊酯类药物的作用靶标之一。大鼠海马锥体神经元钾通道是三氟氯氰菊酯的作用 靶标，通道失活失活曲线的改变是药物作用的主要方式。不同浓度j三氟氯氰菊酯 对大鼠海马神经元钠电流有不同的作用影响，激活电位、峰值电压、激活曲线和