去甲斑蝥素对LPS诱导的体外培养的肝细胞损伤的保护作用.pdfVIP

， 2。 (3) ：／／www．csumed．org；http：／／xbyx一 ．net 去甲斑蝥素对 LPS诱导的体外培养的肝细胞损伤的保护作用 周钧 ，王琴 ，王群伟 ，段文斌 (中南大学湘稚二医院 1．微创外科中心 ；2．妇产科 ，长沙410011) [摘要 】目的：通过体外观察去甲斑蝥素 (NCTD)对LPS所致肝细胞损伤和TNF． 表达的影响，探讨NCTD的作 用及其机制。方法：胶原酶Ⅳ灌流分离培养大鼠肝细胞，将细胞分为对照组、LPS组、NCTD组。对照组用无血清 DMEM培养 ，LPS组用 LPS(40mg／L)诱导，NCTD组用不同浓度NCTD(0．5，1．0，2．5~tgm／L)与LPS(40mg／L)共 同作 用，各组作用时间均为 24h。M1Tr法检测肝细胞的增殖情况、测定培养上清液乳酸脱氢酶 fLDH)含量，ELISA法检 测TNF— 和 IL-6表达。结果：LPS(40mg／L)作用于原代培养大鼠肝细胞 24h后，与对照组相 比，细胞生长抑制率 达 27％，培养上清液 LDH含量增加 20倍，TNF．Ot和 IL一6的表达以及NF—KBDNA结合活性均明显增加 fP0．05)。 给予不同浓度NCTD后，培养上清液 LDH，TNF—Ot和 IL一6的含量及NFKBDNA结合活性均明显下降，且呈量效 关系。结论：NCTD拮抗 LPS所致的肝细胞损伤，其保护作用的机制可能与其抑制 TNF．Ot和 IL一6的表达有关。 【关键词 】去甲斑蝥素；肝细胞；LPS；TNF．Ot DOI：10．3969／j．issn．1672—7347．2012．03．013 Effectsofnorcantharidinon IipopoIysaccharide—induced _hepatocyt·e l■nl■Ury I■nV0itro ZHOUJun，WANGQjn，WAN GQunweiJDUAN Wenbin rj．DepartmentofMinimalInvasiveSurgery2．DepartmentofObstetricsandGynecology,SecondXiangyaHospita‘ CentralSouthUniversity,Changsha410011，China) Objective：Tostudytheeffectsofnorcantharidin(NCTD)onlipopolysaccharide(LPS)一induced hepatocyteinjuryandtheexpressionofTNF—c【andIL一6invitro． Methods：Hepatocytaswereisolatedfrom maleSprague—Dawleyratsbycollagenaseperfusion．LPS atconcentrationof40mg／LwasusedtoinduceinIurytotheculturedcellsJandNCTD(0．5，1．0， 2．5~tg／mL)wasaddedatthesametime．After24hofincubation，thecellproliferationrateswere detectedbyMTf．LDH．TNF—c【andIL一6weremeasuredbyappropriatereagentkits．NF—KBDNA bindingactivitywasmeasured． Results：40mg／LLPScauseda27％growthinhibitioninprimaryhepatocytes．LDH lea