Pax-8基因抑制后心肌细胞中UCP2的表达.pdfVIP

第 42卷第 1期 温 州 医 学 院 学 报 VO1．42No．1 2012年 1月 JournalofWenzhouMedicalCollege Jan．2Ol2 Pax一8基因抑制后心肌细胞中UCP2的表达 戴晓春 ，黄晓燕 ，周希 ，高瞻，王本极 ，张艳丽，杨德业 (温州医学院附属第一医院 心内科，温州医学院心血管生物和基因研究所，浙江 温州 325000) [摘 要] 目的：建立Pax一8基因敲除模型及Pax一8基因的体外干扰实验，探索心肌细胞中Pax一8基因抑制 后解偶联蛋 白2(uncouplingprotein2，UCP2)基因表达的变化。方法：Pax一8基因敲除纯合子小鼠(Pax一 8KO一一／)为实验组，Pax8基因敲除小鼠杂合子 (Pax一8KO一／)和野生型 (Pax一8KO一／)为对照组；同时 在体外实验的大鼠心肌细胞株中，加入Pax一8基因的小干扰RNA(Pax一8siRNA)为实验组，非特异性siRNA (NCsiRNA)组和空白组为对照组。采用RT—PCR和 Westernblotting技术测定UCP2的mRNA和蛋 白质表 达。结果：在Pax一8基因敲除动物模型中，与Pax一8基因敲除小鼠杂合子组和野生型组相比，实验组Pax一 8基因敲除小鼠纯合子心脏组织UCP2的mRNA和蛋白表达均上调 (PO．05)，而对照组之间差异无统计学意 义 (PO．05)；在体外干扰实验中的结果显示，与NC siRNA组和空白对照组比较，Pax一8siRNA组UCP2 的mRNA表达和蛋 白表达均上调 (P0．05)，而NCsiRNA组与空白对照组问差异无统计学意义 (P0．05)。 结论：Pax一8基因被抑制后，心肌细胞凋亡增加，UCP2基因表达上调，提示UCP2参与了心肌细胞凋亡的调 控 。 [关键词] 解偶联蛋白2；Pax一8；心肌细胞；凋亡；基因敲除小鼠 [中图分类号] R541 [文献标志码] A [文章编号] 1000—2138(2012)O1—0001—05 The expression of UCP2 gene in the myocardium after the inhibition of Pax·8 gene DAI Xiaochun．HUANG Xdaoyan．ZHOU xi，GAO Zhan。WANGBenji，ZHANG Yanli，YANGDeye． Depar~ inent of Cardiology．the First Affiliated Hosplta1． Institute for Cardiovascular Biology ＆ Gen， Wenzhou Med1cal College， Wenzhou，325000 Objective：To establish Pax一8 geneknockoutmodelandH9C2f2—1)interference in vitro to inhibit Pax一8 gene in the myocardium， and explore the expression of uncoupling protein2(UCP2)gene．Methods：Pax一8knockoutmousehomozygous(Pax一8KO一／一)wasbuiItasthe experimentalgroup，Pax一8knockoutmouseheterozygous(Pax一8KO／一)andwild—type(Pax一8KO／) group as contro1． In vitro experiments at the same time， short interference RNA targeting Pax一8(Pax一8siRNA)wasaddedintotheH9C2(2-1)asexperimentalgroup，andnonspecificsiRNA group(NCsiRNA)landtheblankgroupascontro1．RT—PCRandWesternblottingwereusedto analyze the expressions of UCP2 mRNA and protein．Results：Compared to the Pax一8 knockout mice heterozy—gouS a