兔卵母细胞体外成熟、体外受精及受精卵体外培养条件的研究.pdfVIP

沈阳农业大学学报，2013—04，44(2)：172—177 JournalofShenyangAgricuhura1University，2013—04，44(21：172—177 兔卵母细胞体外成熟、体外受精及受精卵 体外培养条件的研究 王辉田，罗光彬 ，王忠彬 ，孙 超，陈 思，吴宏平，王娇娇 (沈 阳农业大学 畜牧兽 医学院，沈阳 110161) 摘要 ：为了建立一个完善的兔胚胎体外生产体系，探讨 了TCM一199、M16和 KSOM基础培养液对兔卵母细胞体外成熟 。上游法和 直接洗涤法洗涤处理精液的方法对卵母细胞体外受精及不 同浓度的L一谷氨酰胺对受精卵发育的影响。结果表明：以TCM一199 为基础培养液体外成熟率(72．29％)显著高于 M16成熟率 (59．11％)和 KSOM成熟率(49．57％)，三者之间彼此差异显著 0．05)； 上游法处理精子后 ，体外受精卵母细胞的卵裂率 (64．89％)和囊胚发育率 (18．56％)均高于直接洗涤法 (51．9％，l1．97％)，且差异显 著 (p0．05)；0．5mmol·L～L一谷氨酰胺受精卵培养液组的2—4细胞发育率 (46．55％)、4—8细胞发育率(39．20％)、8—16细胞发育率 (30．40％)、桑葚胚发育率 (26．65％)，均显著高于含 lmmol·L～L一谷氨酰胺受精卵培养液组 (分别为 38．83％、32．02％、25．14％和 22．09％)和含 2reotol·L～L一谷氨酰胺受精卵培养液组 (分为 33．96％、26．70％、21．43％和 17．67％)，且差异显著 (p0．05)，而含 0．5mmol·L～L一谷氨酰胺受精卵培养液组囊胚发育率(15．52％)与含 lmmol·L～、2mmol·L～L一谷氨酰胺受精卵培养液组囊胚发 育率 (分别为 10．59％和7．17％)差异显著 (pO．05)。 关键词 ：兔；卵母细胞 ；体外成熟；体外受精 ；胚胎发育 DOI：10．3969／j．issn．1000-1700．2013．02．008 中图分类号 ：S814．6 文献标识码 ：A 文章编号 ：1000—1700(2013)02—0172—06 IVM ，IVF ofFollicularOocytesand IVC ofin Vitro Fertilized Oocytesin Rabbit WANG Hui-tian，LUO Guang-bin*,WANG Zhong-bin，SUN Chao，CHEN Si，WU Hong-ping， WANGJiao-jiao (CollegeofAnimalHusbandryandVeterinary，ShenyangAgriculturalUniversity，Shenyang110161，China) Abstract：In ordertoestablish a perfectin vitroproduction system ofrabbitemb~o，We explored the effectsoftheTCM一199， M16 and KS0M three difierentbasicnutrientsolutionson the in vitromaturation ofrabbitoocytes．and the upstream method and directwashing method ofsperm washingprocessing methodstreatingsemen ofrabbitoocytein vitrofertilization and different concentrationsofL-glutamine onthe influence oftherabbitzygote．Theresultsshowed thatTCM一199 asthefoundation nutrient solutioninvitromaturationratef72．29％)wasstatisticallyhigherthan thatintheM16maturerate