涅氏短状杆菌（Brachybacterium nesterenkovii）——产酶新菌株.pdfVIP

2009年第 4期 科技探索 ll9 涅氏短状杆菌 (Brachybacteriumnesterenkovii) — — 产酶新菌株 薛永萍 ，汤璐 ，贾金诚 (武汉科技大学中南分校 生命科学学院，湖北 武汉 430223； 。武汉钢铁集团总公司，湖北 武汉 430085) 摘 要：本文从土壤中分离纯化得到的菌株 ，经中国典型培养物保藏中心鉴定，属于国内尚未发现 的 Brach)rbacteriumnesterenkovii种类的一种产酶新菌株。实验表明乙醇和丙酮酸钠均可以作为繁殖ALDH菌株的 诱导剂，但是 乙醇的效果较好。且加入 200Ixl的乙醇于30ml的牛 肉膏培养基，ALDH的活性更高。此外 Brachybacteriumnesterenkovii菌株可以产过氧化氢酶、酯化酶、乙醇脱氢酶和 乙醛脱氢酶等多种酶，并对其培 养条件做了相应的研究。 关键词：涅氏短状杆菌；分离；酶 中图分类号：Q939 文献标识码：A Brachybacterium属发现于 1988年 ，目前 国内 株能产生一些具有经济价值的酶且该酶活性较高， 尚无报道。Brachybacterium属，目前仅发现了10种 ， 如过氧化氢酶、酯化酶 、乙醇脱氢酶、乙醛脱氢酶 分别是 B．alimentarium，B．conglomeratum，B．faeci： (AldehydeDehydrogenase，ALDH)等。因此该菌株 um ，B．fresconis，B．nesterenkovii，B．paraconglomera- 具有较高的应用价值和市场前景，如可以利用它开 turn，B．rhamnosum，B．sacelli，B．tyrofermentans和 发解酒的药物或保健品等。 B．muffs。其中最早发现的是B．Faecium (Collinset． 1 材料和方法 al，1988)…。我们筛选得到的菌种 B．nesterenkovii 于 1992年首次报道 (GvozdyakORet．a1．，1992)， 1．1 土样来源 与B．faecium相比，B．nesterenkovii的细胞壁结构缺 从湖北、甘肃和江西等地采集了30多种土样。 少肽聚糖 ，两者 DNA—DNA杂交结果表明同源性仅 1．2 培养基 为22％E2]。 筛选菌株选用了不同的培养基：牛肉膏培养基 、 从土壤中筛选得到的一种 国内尚未报道过的B． 土豆培养基 (PDA)和MRS培养基 。 nesterenkovii菌种 ，与国外已经报道过的B．nesteren． 1．3 菌种分离方法 kovii菌种在培养条件和来源上都不同。根据文献资 采用平板分离法进行菌种的多次分离纯化，经 料 ，目前筛选 B．nesterenkovii菌株都是从奶酪 中分 镜检为单克隆菌株 ，于4℃下保藏 。 离得到 。而我们得到的菌株来源于微生物多样性 1．4 摇瓶产酶试验 很高的土壤 ，培养 的工艺条件也较为简单易行。目 将筛选到的菌种由斜面接到3Oml(250ml三角 前国外对于这种菌种的研究大多集 中在基因和氨基 瓶)液体培养基中，加入一定量 的乙醇、丙酮酸钠 酸序列的测定分析方面，对于它的功能 尚未有过研 和乳酸钠诱导剂 ，于30c=【～37℃、150r／min下 究报道 。通过对该菌株生理生化特性的鉴定 (中 培养 4d～6d。定时取样离心破碎后测定其产酶 国典型培养物保藏中心，武汉大学)，我们发现该菌 活力。 收稿 日期 ：2009—09—22 作者简介：薛永萍 (1979一)女，甘肃天水人，武汉科技大学中南分校生命科学学院教师，硕士；汤璐 (1980一)女，湖北武汉 人，武汉科技大