全血反复冻融对工作站提取基因组DNA的影响.pdfVIP

96 现代检验医学杂志 第 24卷 第 3期 2009年 5月 JModLabMed，Vo1．24，No．3，May．2009 全血反复冻融对工作站提取基因组DNA的影响 王大明，邹红岩 ，李 桢 ，邓志辉 (深圳市血液中心输血医学研究所 ，广东深圳 518035) 摘 要 ：目的 研究全血样本在反复冻融后对DNA工作站抽提基 因组DNA含量和纯度 的影响。方法 研究随机抽取 100 份样本，相隔一天连续进行反复冻融四次，将每次融化的样本运用DNA工作站抽提基 因组DNA，并用紫外分光光度仪测 定其浓度和纯度及琼脂糖 电泳检测DNA 完整性 。结果 全血样本反复冻融组间比较抽提基 因组DNA 的含量和纯度 ，含 量 (g)方面，第一次为 2．220士1．004，第二次为 2．956士0．768，第三次为 2．540士0．817，第四次为 2．760士0．881；纯度 (A “ot-m／A28～)方面，第一次为 1．748土0．076，第二次为 1．780±0．069，第三次为 1．855士0．058，第四次为 1．750士0．071。 检测结果提示差异均无统计学意义 (．P0．05)，检测 DNA 长度大于 15kb。结论 反复冻融次数对DNA 工作站抽提全血 样本基 因组 DNA 的含量和纯度均无影响，具有快速 、高通量化的特点和广泛的应用前景 。 关键词 ：DNA；全血 ；反复冻融 ；DNA工作站 中图分类号 ：Q781 文献标志码：A 文章编号：1671—7414(2009)03—096—03 doi：10．3969／j．|ssn．1671—7414．2009．03．036 EffectofDNA Extraction from W holeBloodthatwasFrozen andThawedoutRepeatlybyUsingTECAN DNA W orkstation WANGDa—ming，ZOUHong—yan，LIZhen，DENGZhi—hui (ShenzhenInstituteof TransfusionMedicine，ShenzhenBloodCenter，GuangdongShenzhen518035，China) Abstract：Objective TostudytheeffectofDNA extractionfromwholebloodthatwasfrozenandthawedoutrepeatlyon contentandpurity．M ethods 100sampleswerefrozenandthawedoutfourtimesrepeatlyeveryotherdayatdiscretion． DNA wereextractedfrom thethawedoutsamplesbyusingTECAN DNA workstationandsurveyedconcentrationandpu— ritybyUV—spectrophotometerandtheintegralityoftheseDNA sampleswererune1ectrophoresisontheagarosege1．Re— suits ComparedcontentandpurityofDNA thatwereextractionfrom wholebloodingroups．Oncontent(g)，from one timetofourtimewas2．220士1．004，2．956土0．768，2．540士O．817and2．760±0．881inturn．Onpurity(A260 ／Az80 )， from onetimetofourtimewas1．748士0，076，1．780士0．069，1．855±0．058and 1．750士0．071inturn．Buttherewere bothnoobviouseffectoncontentandquantityofDNA (P0．05)．ThemolecularweightofDNA wasallmorethan15kb insize．ConcIusion Thesamplesrepeatlyfrostandthawedwerenoeffectoilcontentandpurity．Thishighthrough—put DNA extractingmethodshowedabroadapplication inothermolecularbiolog