慢性鼻窦炎伴嗅觉障碍患者嗅觉神经元的凋亡与再生.pdfVIP

中文摘要 慢性鼻窦炎伴嗅觉障碍患者嗅觉神经元的 凋亡与再生 摘 要 目的：慢性鼻窦炎是引起嗅觉障碍的最常见原因之一。 嗅细胞是一种唯一直接与外界环境相接触的能够再生的双 极神经元。正常情况下，生物体内嗅觉神经元(01factory receptorneurons，ORNs)的再生与凋亡处于动态平衡之中， 即通过基底细胞生成，神经细胞分化、成熟，ORNs凋亡的 动态平衡而维持正常的嗅觉功能。这种动态平衡一旦被破 坏，凋亡超过再生，就会产生嗅觉障碍。慢性鼻窦炎伴嗅觉 障碍患者ORNs减少，究竟是因细胞坏死，抑或因细胞凋亡， 以及慢性炎症状态下其减少程度与再生能力的关系如何，国 内尚无报道。本课题通过研究慢性鼻窦炎伴嗅觉障碍患者 0RNs的凋亡与再生，及其相关的调控基因，探讨慢性鼻窦 炎性嗅觉障碍的发病机制，从而为临床利用鼻内窥镜以及药 物等综合手段治疗慢性鼻窦炎性嗅觉障碍提供理论依据。 方法： 1病例选择、实验分组及取材选择2005年2月一2005年8 月住院行功能性鼻内窥镜手术治疗的患者46例，男26例， 女20例，年龄20—56岁，平均33．7岁，所有患者均无头颅 外伤史及神经系统疾病病史。术前采用CCCRC嗅觉检查法 检测患者的嗅觉功能，根据嗅觉评分结果将其分为以下三 组：A组：慢性鼻窦炎伴嗅觉障碍患者(嗅觉评分6．O，无 明显鼻中隔偏曲)25例；B组：慢性鼻窦炎不伴嗅觉障碍患 中文摘要 者(嗅觉评分≥6．0，无明显鼻中隔偏曲)1O例；C组：单纯 鼻中隔偏曲行鼻中隔矫正术患者(嗅觉评分≥6．O，鼻窦CT 检查结果无慢性鼻窦炎)11例。经患者知情同意，行鼻内窥 镜手术时在直视下用鼓膜切开刀在上鼻甲相对的鼻中隔上 部嗅区粘膜上划四刀呈正方形(3mm×3mm)，深度直达骨 膜，用小号筛窦咬钳钳取嗅粘膜，将钳夹部分切除后，4％多 u 聚甲醛固定，梯度酒精脱水，石蜡包埋，4 m切片。 2病理组织学观察切片经髓染色，在光镜下观察，确定所 取粘膜为嗅粘膜；观察嗅粘膜的病理变化。 3免疫组织化学方法检测促凋亡基因Bax、抑凋亡基因Bcl cellnuclear —2、增殖细胞核抗原(pr01iferatingantigen， nerve PCNA)、低亲和力神经生长因子受体(10wa蚯nitv factor r，LNGFr)在三组患者嗅粘膜中的表达。 gro叭h recepto 应用肿IAS一1000(德国、)高清晰度病理图文报告分析系统所 提供的免疫组化的定量方法进行分析。 结果： 1病理组织学观察光镜下正常嗅粘膜(C组)以基底膜为 界，分为表面的上皮层和下方固有层。上皮层游离缘可见较 多的纤毛和嗅泡。嗅上皮为假复层柱状上皮，由嗅细胞、支 持细胞、基底细胞三种细胞组成；胞核有明显的核层分布。 支持细胞位于表层，核大而细长，呈垂直位，且深染；嗅细 胞位于上皮层的中下层，核呈椭圆形，较大，其中不成熟的 0RNs位于成熟的0RNs下方；基底细胞靠近基底膜，呈单 排排列，核呈圆形，稍小。固有层内有大量的嗅腺(Bowman’s 腺)和嗅神经束(嗅丝)。慢性鼻窦炎不伴嗅觉障碍患者(B 组)的嗅粘膜在光镜下观察无明显的病理改变，有的固有层 中文摘要 内可见少量炎性细胞浸润，核层排列稍紊乱。慢性鼻窦炎伴 嗅觉障碍患者(A组)的嗅上皮明显变薄，ORNs细胞数明 显减少，核层排列明显紊乱，有的已失去正常的核层结构， 有的粘膜缺失，呼吸上皮化生，固有层内Bowman’s腺粘液 性化生，有大量炎性细胞浸润。 2免疫组化的表达情况 2．1Bcl一2与Bax在ORNs中的表达情况 在嗅粘膜的0RNs中，Bcl—2在A组表达的积分光度值 与B组、C组相比明显增大，其差异均有统计学意义 大，其差异无统计学意义(p0．05)。Bax在A组表达的积分 光度值与B组、C组相比明显增大，其差异