应用组织芯片对EGFR和Her-2蛋白表达及基因扩增的研究.pdfVIP

2．7同一切片伊红着色不均 同一张切片中，伊红着色深浅不一致，局部甚至出现伊红完全不着色的现象。各种组织均有出现，以 富含细胞结构较致密的组织中出现的几率大。 出现的原因：饱和碳酸锂水溶液返蓝后未充分水洗，导致碳酸锂残留，阻碍伊红着色。 3一些个人体会 冰冻切片制作是一个精细的过程，这就对病理技术工作者提出以下几点要求：(1)制片过程操作规范 化：注意切片后立即固定切片，避免切片组织干燥引起的染色不良；切片须经梯度酒精脱水二甲苯透明后 及时封片，不能将切片吹干或烤干后封片；勤于更换固定液及染液，以保证试剂质量稳定。(2)在工作中 善于观察勤加练习，注意不同组织切片过程中的细节处理，做到人机良好配合，拥有娴熟的切片技术。(3) 不断加强组织学、化学、病理学等基础理论的学习，能在理论指导下不断进行试剂的改良。(4)对恒温冰 冻切片机进行合理科学的维护使其随时处于良好的工作状态。 拥有规范化、细致及娴熟的切片技术才能切出平整无皱摺，无裂痕，无冰晶、组织形态结构与染色良 好的冰冻切片。规范的冰冻切片操作是高质量的冰冻切片的基础，优良的冰冻试剂是高质量冰冻切片的保 证。病理技术工作者只有在工作中做到理论指导实践，实践完善理论，拥有扎实的理论基础才能真正促进 病理技术的不断完善与真正意义上的创新。 参考文献 1． 2． 何瑾馨．天然染料的分类、结构及性能[M]，，何谨馨。主编．染料化学．第一版．北京：中国纺织出版社，2009：256-260． 应用组织芯片对EGFR和Her-2蛋白表达 及基因扩增的研究 宋欣吕亚莉李向红 (中国人民解放军总医院病理科，北京100853) 【摘要】目的：对EGFR及Her-2蛋白表达和基因扩增情况进行比较分析。方法：对中国人民解放军总 医院病理科常规病理诊断中确诊为肺癌和乳腺癌病例重新整理分析，应用组织芯片、免疫组织化学和FISH 以散在信号存在。并且EGFR蛋白表达和基因扩增之间存在正相关，二者之间相关关系显著(P0．005)。 白的表达为临床应用该技术进一步筛选病例、选择治疗方案、预后提供了可靠的依据。 【关键词】细支气管肺泡癌；肺腺癌；EGFR：IHC；FISH；组织芯片 近年来随着分子生物学技术的发展，针对分子靶点的抗肿瘤药物大量出现。分子靶向治疗是一种新型 的抗癌治疗方式，目前大量的研究集中在寻找靶向治疗敏感的有效标志，主要包括基因扩增、基因突变以 及蛋白表达及其临床特征，哪一改变可以提示在临床中的治疗，是目前研究的主要目标。 跨膜区及主要由酪氨酸激酶组成的细胞内区等三个区域组成【l】。EGFR和Her-2基因的活化将促使下游信 号途径的异常激活，导致基因和蛋白水平均发生改变，与肿瘤的发生发展密切相关。 靶向治疗药物已大量用于临床，其独特的疗效引起人们的极度关注。针对Her-2的单克隆抗体药物 (吉非替尼)是目前成功应用的典范。研究显示，靶向治疗药物的应用可明显提高病人的生存时间，但不 同病人之间疗效不同，因此寻找治疗敏感的特异性有效标志物则尤为突出。 应用荧光原位杂交和免疫组织化学的方法检测EGFR和Her-2基因的扩增、和蛋白表达是目前主要的 检测手段，我们通过组织芯片对其基因扩增和蛋白表达情况进行比较分析，分析了二者之间的相关性，为 临床应用该技术进一步筛选病例、选择治疗方案提供有价值的资料。 1材料与方法 年至2007年间确诊为乳腺癌的209例病例进行了重新整理和回顾。肺癌89例病例中经典型肺腺癌23例， 导管内癌43例。对其分别进行EGFR和Her-2蛋白表达和基因扩增的检测。 1．2方法 1．2．1组织芯片制作 标本经4％甲醛固定，石蜡包埋。首先在普通光镜下对肿瘤组织的RE切片进行形态学观察，选取组 织结构正常、没有出血、坏死的肿瘤组织及所需部位并在蜡块的相应位置定位。根据病例数、肿瘤发生部 位、年龄情况设计组织芯片的阵列，以正常组织作为正常对照。应用组织芯片制作仪(美国Beecher公司) 1．2．2免疫组织化学染色 PBS缓冲液替代一抗作为空白对照。 1．2．3FISH检测 入0．2N PH7．0洗；去 即盖上盖玻片，放入3712杂交仪(美国Stat