用RAPD技术对5种经济海胆基因组DNA多态性的研究.pdfVIP

与MALDI—TOF—MS联用可以同时对新筛选的抗癌药结构进行鉴定。 质酶解称为生物芯片质谱法(biosensormass chip 4．结束语 新的联埔技术及其应用，虽然历史较短，但这几种联用技术有其各自的优势和特点，可以使活性成 分和天然生化药物的分离纯化、结构分析以及新药筛选等方面的研究提高到分子生物学的高新技术水平。 我们相信，随着这类联用技术的发展和进一步的应用将为海洋生物药物和天然生化药物的研究开拓 更加广阔的前景。 参考文献(略) 用RAPD技术对5种经济海胆基因组DNA多态性的研究 常亚青1，丁君1，邢荣莲1，宋林生2，倪多娇2 (1．大连水产学院农业部海洋水产增养殖学与生物技术重点开放实验室，大连116023： 2．中国科学院海洋研究所 实验海洋生物学开放实验室青岛266071) 海胆是一类比较常见的海洋无脊椎动物，早期研究主要集中在海胆的发育生物学方面…，如受精机 制、实验胚胎学和分子胚胎学等基础理论的研究上晗11。可食用海胆具有很高的医疗保健作用，世界上许 多地方都有食用海胆的传统。海胆市场价格很高，消费量却非常大。为满足人们对海胆的需求，世界许 多国家如日本、法国、爱尔兰、智利，及美国东北部、加拿大的沿海各省以及从北美西海岸的加利福尼 亚州到英国的哥伦比皿都进行了过量捕捞啼喵1，导致对海胆养殖兴趣的不断增加，海胆的人工养殖和苗种 生产的研究逐渐开展起来嵋’71引。尽管国外对海胆形态学、生物化学以及遗传学的研究都有报道n卜131，但 目前关于海胆分类方面的研究却相对较少u“H1，只有张风瀛n引对海胆进行了比较系统的描述。深入了解 海胆的分类地位和亲缘关系是进行合理有效的杂交育种、获得优良经济性状的基础。 随机扩增多态性DNA(RandomAmplifiedPolymorphic ．和Welsh¨6J领导的两个小组几乎同时发展起来的一项分子生物学技术，已被广泛地应用在陆生动植物的 分类研究中…{¨，近年来，该技术也广泛应用于水产动物如鱼、虾、贝、藻等主要水产生物亲缘关系及 其演化过程的研究心2瑚’。GarciaD．K．等控“通过RAPD技术研究了斑节对虾Penaeusmonodon的遗传变异， 并讨论了此技术在对虾选育种中的应用前景；宋林生等比引对6种海产对虾类基因组DNA多态性的RAPD M．U。等旧引用RAPD技术研 标记进行研究，得出6种虾的亲缘关系与传统的分类结果基本一致；Patwary 究了扇贝(Placopectenmagellanicus)的遗传结构：HeipelD．A．等啪1利用RAPD比较了英国西部的 大扇贝(Pecten 大连湾牡蛎(Cassostrea ·472· 的研究国内外尚未见报道。 本文研究的5种海胆是目前我国最主要的经济类海胆，分属于3个科。但在分类学研究方面资料很 少，在分子水平上的研究更是尚未起步，本文用RAPD技术于基因组DNA多态性的研究，探讨该技术在海 胆的种质鉴定及亲缘关系研究中的可行性，同时探求一种能有效补充传统分类方法的辅助手段，为我国 海胆的遗传育种和增养殖的进一步深入研究打好基础。 1．材料与方法 1．1材料 紫海胆(Anthocidaris crenularis), nudus)和虾夷马粪海胆 均取自大连市沿海。虾夷马粪海胆为1989年大连水产学院引种的后代个体。 1．2基因组DNA的提取 在海胆围口膜与外壳相连接的部位用刀片轻轻割开，将口器小心取下，用经灭菌消毒过的剪子或刀 1．t 10 片将紧贴在齿上的齿间肌肉束刮下，收集到Effendorf管中，加入500L匀浆缓冲液(Tris-HCl 100 5 mmol／L，pH=8．0：EDTAmmol／L)和5