二十碳五烯酸抑制早期糖尿病肾病单核细胞趋化蛋白-1的表达.pdfVIP

· 174· 堡苤查 垦 !!』 ! !oJgy2010，26(1)：174—176、187 [文章编号] 1000—4718(2010101—0174—04 二十碳五烯酸抑制早期糖尿病肾病单核 细胞趋化蛋 白一1的表达 张敏芳 ， 钱家麒， 戴慧莉， 倪兆慧 (上海交通大学医学院附属仁济医院肾内科，上海 200001) [摘 要] 目的：观察二十碳五烯酸(EPA)对早期阶段的糖尿病肾病单核细胞趋化蛋白一1(MCP一1)表达 的影响。方法：体内实验中，KKA ／Ta小鼠随机分为2组：治疗组予以EPAlg·kg～ ·d 腹腔内注射共8周 ，对 照组同步予以生理盐水注射，应用免疫组化和实时RT—PCR检测肾脏 中MCP一1表达及巨噬细胞浸润的变化。 应用ELISA方法检测高糖和EPA刺激后的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)上清MCP一1的表达。结果：EPA治疗后 KKA ／Ta小鼠肾脏MCP一1的蛋白表达及巨噬细胞浸润明显减弱。实时RT—PCR结果显示EPA治疗组小鼠肾皮 质MCP一1mRNA的表达明显低于对照组。25mmol／LD一葡萄糖作用72h可引起HUVECs分泌MCP一1明显增 加 ，30i~mol／L和50~mol／LEPA均可显著地抑制高糖诱导的MCP一1表达。结论 ：EPA降低了KKA ／Ta小鼠肾 脏及高糖诱导的内皮细胞MCP一1的表达，提示EPA可能抑制早期糖尿病肾病的炎症反应。 [关键词】 糖尿病肾病；二十碳五烯酸；KKA ／Ta小鼠；人脐静脉内皮细胞；单核细胞趋化蛋白1 [KEYWORDS] Diabeticnephropathies；Eicosapentaenoieacid；KKA／Tamice；Humanumbilicalveinendothe— lialcells；Monocytechemotacticprotein一1 [中图分类号] R587．1 [文献标识码] A 2型糖尿病肾病已成为终末期肾脏疾病的主要病因。目 5．0软件 自行设计，LifeTechnologies公司合成。EPA—Na 前研究提示糖尿病肾病常常伴随有炎症状态，早期 2型糖尿 (Sitona)。D一葡萄糖和D一甘露醇(siB)。特异性人MCP一1 病患者中，急性时相炎症指标如C反应蛋白、白细胞介素 一6 ELISA检测试剂盒 (RD)。 和纤维蛋白原等与肾脏病理变化 (基底膜增厚和系膜基质增 2 方法 加)程度一致，提示炎症参与糖尿病肾病的发病过程…。富 2．1 动物分组 KKA ／Ta小 鼠(n=16)随机分为 2组，EPA 含 n一3多不饱和脂肪酸 (n一3polyunsaturatedfattyacid，n一3 给药从第 12周开始，此时 KKA ／Ta小鼠处于糖尿病肾病的 PUFA)的饮食，特别是鱼油中的二十碳五烯酸 (eicosapentae— 早期阶段。治疗组 KKA ／Ta小 鼠(n=8)予 以EPA乙酯 noicacid，EPA)和二十二碳六烯酸 (docosahexaenoicacid， 1g·kg～ ·d 腹腔内注射共8周 ，未治疗组 (n=8)同步予 DHA)对临床的多种炎症性疾病显示有益 ，但在糖尿病肾 以生理盐水注射。20周龄时乙醚麻醉后使用放血法处死所 病中的作用少有报道。为此，我们观察了EPA对早期阶段的 有动物，经主动脉使用生理盐水以120mmHg压力灌洗至肾 2型糖尿病肾病动物模型 KKA ／Ta小鼠和对高糖诱导的脐 脏颜色转白，部分肾组织于液氮中保存，部分使用温度敏感 静脉 内皮细胞 (humna umbilicalveinendothelialcells，HU— 的组织包埋剂(OCT)冰冻后一80℃保存。 VECs)单核细胞趋化蛋 白一1(monocytechemotaeticprotein一 2．2 表型检测 2O周龄时检测小鼠的体重和血压，眼眶后 1，MCP一1)表达的影响。 窦采血检测空腹血糖、胆固醇和甘油三酯水平，使用代谢笼 (日本Clea)收集小鼠24h的尿液标本检测尿 白蛋白／肌酐比