免疫活性地龙肽的制备及其对小鼠NK细胞活性的影响.pdfVIP

维普资讯 中国医科大学学报 第 36卷 第 6期 2007年 l2月 · 650· J0t腑 ALOFCHINAMEDICALUNⅣERSⅡY vd．36 No．6 Dee．20 免疫活性地龙肽的制备及其对小鼠NK细胞活性的影响 傅炜昕，董 占双 ，李铁英 ，许静 ，纪晓莉 ，贾秀坤 ，梁再赋 (1．中国医科大学实验技术中心，辽宁 沈阳 110001；2．基础医学院病原生物学教研室；3．附属盛京医院皮肤科) [摘要]目的：提取低分子量免疫活性地龙肽，并就其对 自然杀伤(NK)细胞活性的影响进行体外研究。方法：采用粗分离、凝胶 过滤层析和阴离子交换层析等方法分离纯化地龙肽；采用乳酸脱氢酶法测定NK细胞活性。结果：用凝胶过滤层析分离得到地 龙肽T(分子量8000—20000，含有7种蛋白)。用离子交换层析又将地龙肽T分为A、B两部分，地龙肽A由5种蛋白组成，其 中有4种分子量在 13000以下；地龙肽B仅由一种蛋白构成，分子量约 l1000；地龙肽A和T可明显提高NK细胞的活性 ；地 龙肽A、B和T皆可减弱环磷酰胺和地塞米松的免疫抑制作用，提高NK细胞的杀伤率。结论：地龙肽T、A单独应用即可以增强 NK细胞的活性，并与IL-2具有协同作用；地龙肽T、A和B还可以拮抗地塞米松、环磷酰胺等免疫抑制剂。 [关键词]地龙肽；自然杀伤细胞；免疫活性 [中图分类号]R392．2 [文献标识码]A [文章编号]0258—4646(2007)06—0650—03 Preparationofinlnluno-activeearthworm peptidesand itseffectontheactivityofnaturalkillercellinmice FUWei-xin，DONGZhan-shuang~，LITie-ying，XUJing~，JIXiao—h ，JIAXiu-kun ，LIANGZai-fu (1．CentralLaboratory，ChinaMedicalUniversity，Shenyang110001，China；2．DepartmentofPathogenicBiology，CollegeofBasicMedicalSciences；3．Depaa meritofDexmatology，ShengjingHospita1) [Al~raet]Objective：Toextractandpurifylowmolecularweightinmauno—activeearthwormpeptides，andtostudyitseffectsontheactivity ofnaturalkillercell(NK)cellsinvitro．Methods：Theinmauno—activeeaithWOllTlpeptideswereseparatednadpurifidethrouhgcrudeespara— lion，gelfiltrationchromatographynadDEAE—esphadexA一25naionexchnagechromatography．Th eactiviytofNK cellswasdeterminde wiht Lactatedehydrogenaseme~od．Remdts：Theealthwomr peptidesT (containingesvenproteinswihtmolceulraweihgt20000)werepmpared thx,~uhgSephadexG一25gelflitrationchromatography，nadhtenweredividedintotwoparts，ealthwonTlpeptidesAnadearthwormpeptidesB， byDEAE—esphadexA一25anionexchnagechromatography．Earthwomr peptidesA Was composedoffivecomponents，includingfourproteins whosemolecularweightsweresmallerhtna 13000．Earthwomr peptidesBWasasirlgleprotein，whosemoleculraweihgtWas 11000．Con- clusion：Theea