表位水平的研究病毒流行病学方法探讨.pdfVIP

卷 期 ! # 微 生 物 学 报 ’( )! .’ ) # 年 月 $$ % !#$ %’()(*(+$ ,-$ *+,- $$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 表位水平研究病毒流行病学的方法探讨 0 来大志 杜 勇 杜桂鑫 陈 薇 王海涛 （北京微生物流行病研究所 北京 0$$$10） 摘 要：应用噬菌体随机展示肽库和硫氧还蛋白表面展示技术，建立了在表位水平研究病毒 流行病学的方法，并以丙型肝炎病毒核心区蛋白做了初步验证，证明该方法高效可行。 关键词：表位，流行病学，肽库，噬菌体，硫氧还蛋白，表面展示 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） 4#1# 5 $$$03%$/ $$ $#3$##03$! 病毒一直是人类健康的巨大威胁，如艾滋病病毒、甲型到戊型肝炎病毒、流行性出血 热病毒、流行性乙型脑炎病毒、登革病毒等每天都在吞噬着人类的生命。人们曾花费了巨 大的人力物力财力筛选抗病毒的药物，但迄今为止还没有选到任何令人满意的药物。由 于病毒一般仅由蛋白和核酸组成，在细胞外以无生命的形式存在，使得传统以阻断物质代 谢而发挥杀伤作用的药物对它们无可奈何。而一些阻断病毒胞内复制的药物，如4.5 或 类似物、碱基类似物（如临床上用于治疗艾滋病的 ）、 聚合酶抑制物等势必 6.5 578 6.5 也会对细胞的正常生命活动造成影响，从而在临床上表现为巨大的毒副作用。现在人们 越来越把注意力投向人类自身的免疫系统，通过免疫接种、非特异性增强机体免疫能力或 特异性加强免疫系统对病毒的识别和杀伤来达到预防和治疗病毒性疾病的目的。到目前 为止，免疫接种是防制病毒性疾病最为有效的手段。我国已经开发了多种基因工程重组 疫苗、减毒活疫苗和灭活疫苗，为病毒性疾病的预防作出了巨大的贡献。不过，以上疫苗 也有不尽人意的地方，实际上病毒颗粒真正能刺激机体产生保护性抗体的表位是有限的， 由于没有有效的深入到表位水平的研究方法，无法把大多无用表位除去，使得疫苗的造价 较高，同时还会引起一些副作用。另外有些病毒很难开发出有效的疫苗，要么是由于免疫 原性差，要么是由于毒株易变异，如艾滋病病毒和丙型肝炎病毒。如果能结合人群的各种 特征（病毒健康携带者、发病期、恢复期、愈后、病程迁延等等），对各变异株的各个表位在 人群中的分布进行统计学分析，就可以得到大量有用的信息，例如哪些表位的相应抗体与 病毒消除有关、哪些表位在受染人群中分布最广等，从而为表位疫苗的设计和诊断试剂的 开发以及疾病流行趋势的评估提供有力的根据。基于以上认识，我们利用现在已经比较 成熟的噬菌体随机肽库展示技术和硫氧还蛋白分子表面展示表达系统（ ， ）， 9,:;=’-, ?@5 创建了筛选表位和分析表位的方法，为在表位水平了解病毒的流行病学特征提供了一种 手段。本文以丙型肝炎病毒核心区（ 区）基因为代表，对此方法作了初步的验证，现介绍 A 如下。 本课题受国家自然科学基金（ ）资助 #/%#$$$ 0 并列第一作者。参加工作的还有：侯利华，陈万荣，刘树铃，翁少洁 作者简介：来大志（ ），男，黑龙江拜泉人，在读博士生，主要从事分子病毒学和生物工程学方面的研究。 0/1% 2 收稿日期： ，修回日期： $$03$13$/ $$030$30