蛋白质芯片及其的应用.pdfVIP

　国外医学分子生物学分册2003 年第 25 卷第 1 期 ·19 · 蛋白质芯片及其应用 崔建国　蔡建明　黄越承 ( ) 第二军医大学海医系放射医学教研室 上海, 200433 　　摘要　人类基因组计划的实施和大量珍贵的功能基因组数据的获得, 使得蛋白质的研究显得越发重要。蛋白 质芯片技术的出现为我们提供了一种较传统的凝胶电泳技术更为方便和快速的研究方法。 关键词　蛋白质芯片; 　生物芯片; 　蛋白质微阵列 阵列原理设计出了蛋白质微阵列。他们先将一层牛 1　蛋白质芯片的分类及制备 血清涂布在玻片表面, 再将探针蛋白质点在牛血清 蛋白质芯片目前主要分为两种: 第一种, 也是较 表面上, 利用牛血清蛋白提供的亲水表面防止探针 为常用的一种, 类似于较早出现的基因芯片, 即在固 蛋白发生变性, 点样密度为 1600 2 , 各点的直径 cm 相支持物表面高度密集排列的探针蛋白点阵。当待 在 150～ 200 m 之间。与微阵列进行孵育的蛋白 测靶蛋白与其反应时, 可特异性地捕获样品中的靶 质、酶作用的底物小分子物质分别标有不同颜色的 蛋白, 然后通过检测系统对靶蛋白进行定性及定量 荧光基团, 反应结束后采用通用的激光聚焦扫描分 [ 1 ] 分析 。最常用的探针蛋白是抗体, 因为抗原抗体 析系统进行检测。这一方法较为成功地解决了固相 的反应具有很高的特异性。实验时, 通常在样品中的 支持物表面蛋白质活性的问题, 而且使得操作过程 [ 6 ] 蛋白质上预先标记荧光物质或同位素, 结合到芯片 得到很大的简化。另外, U etz 等人 首次利用活体 上的蛋白质就会发出特定的信号, 然后用CCD 照相 酵母细胞构建了第一个基因组规模的活体蛋白质芯 技术及激光扫描 系统等对信号进行检测。另外还可 片。芯片主要用来研究蛋白质与蛋白质之间的相互 以利用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技 作用, 包含了 6000 个酵母克隆。每个克隆所要表达 术( ) 将靶蛋白离子化, 然后直接分 的蛋白质, 其编码开放阅读框架( ) 与 4 激 SELD I TO F M S OR F Gal 析靶蛋白质的分子量以及相对含量。第二种蛋白质