雷帕霉素对培养的人脐静脉内皮细胞抗栓功能的影响.pdfVIP

主堡匿堂盘查垫!!生!旦!!旦筮!!鲞筮!!塑盟型丛鲤』g蔓垂坚：!!婴!!，垫!!：!丛：!!：盟垒!! -128l· ．基础研究． 雷帕霉素对培养的人脐静脉内皮细胞 抗栓功能的影响 聂晓敏周玉杰李艳芳谢英 苏利霄 【摘要】 目的观察雷帕霉素对培养的人脐静脉内皮细胞(HuVEc)抗栓功能的影响。方法 将体外培养的HuVEc中加入不同浓度[0(对照组)、0．1、1和10 n∥IIll]的雷帕霉素，孵育2、4、8、12 和24h后分别用实时定量RT．PcR和westeH．印迹方法检测组织因子(，IF)、纤溶酶原激活剂抑制物 (PAI．1)、内皮源性一氧化氮合酶(eNOS)和m栓调节蛋白(TM)的mRNA和蛋白表达；采用血液凝固 分析仪评估HuVEc的凝血功能。结果雷帕霉素呈浓度依赖性提高了TF和PAI-1的表达，抑制了 eN0s和TM表达，mRNA水平在孵育后8h最明显，蛋白表达在12h最为显著，与正常HuVEC(对照 0．009)，TF升高了2．8倍(P=O．006)，持续至24h；雷帕霉素可显著缩短HuVEc的凝血时间[对照 组(152±17)s与雷帕霉素组(89±9)s，P=O．005]。结论雷帕霉素呈浓度依赖性升高了促栓基因 TF和PAI-l表达，抑制了抗栓基因eN0s和TM表达，从而导致内皮抗栓功能失调，凝血时间缩短，这 为进一步认识雷帕霉素洗脱支架置人后血栓形成的机制提供了实验依据。 【关键词】 内皮细胞；血栓形成；雷帕霉素；药物洗脱支架 Eak缸ofsiroIinms Ul咖nboticfhnc廿onofh咖anumbiHcalveinendotlIeHalceUs up帆eIldotlleHaI ^忸xi∞·盹n，z日0u砘手e，Ⅱy口n扣ng，姗n昭，．sU丘一菇i帆Dep州舢眦矿仇舶zogy，锄钌妇以 A几如en月ospifⅡZ．￡印矗oZ胁d面以￡7h矗Je倦如，，上}ei面，孵J0∞29．Chi，m corr唧。础昭口眦^or：删0u地和，Em0以：必oMJ2@si胞∞m Toexploretheeff．ectsofsirolimusendothelialthromboticfunctionof I Abstract】objec廿ve upon humanumbilicalveinendotllelial Sirolimuswasaddedintothein秽itro cells(HUVEC)．Methods cultured HUVECatt|leconcentrationsof 10 24h O(contr01)，0．1，1舳dn∥m1．At2．4，8．12粕dpost． cellswerehanrestedfbrdeteHIlinationoftissue activator incubation。the factor(TF)，plasIIlinogeninhibitor nitricoxide reverse (PAI一1)，endothelialsynthase(eNOS)andtIlmmbomodulin(TM)expressionby chain blot．7rhe functionsof tran8cription—polvmerasereaction(RT—PCR)andWestem clotting HUVECwere anautomated Sirolimusinducedthe ofTFandPAI．1 assayedby coagulationanalyzer．Reslllts expressions and the of andTMina