白木香3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶(AsHMGS)基因的克隆与表达分析.pdfVIP

白木香3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶(AsHMGS)基因的克隆与表达分析.pdf

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植物研究 2014,34(1):75—84 BulletinofBotanicalResearch 白木香3一羟基一3一甲基戊二酰辅酶 A合酶 (AsHMGS)基因的克隆与表达分析 刘 娟 徐艳红 杨 勇 梁 良 高志晖 杨 云 张 争 隋 春 魏建和 (1.中国医学科学院 &北京协和医学院,药用植物研究所,北京 100193;2.中国医学科学院 &北京协和医学院,药用植物研究所海南分 所,海南省南药资源保护与开发重点实验室,万宁 571533;3.山东中医药大学,济南 250355) 摘 要 以白木香 (Aquilariasinensis(Lour.)Gilg)茎 cDNA为模板,采用反转录PCR及 RACE技术分离得到HMGS 基因eDNA全长。序列分析表明该基因序列全长 1831bp,共编码465个氨基酸,推导的蛋白质分子量为51.4kD, 理论等电点6.25,命名为AsHMGS。推导的AsHMGS蛋白质序列具有植物HMGS酶的典型结构,并预测出HMGS 酶的活性 中心。系统进化树分析表明,AsHMGS蛋白与拟南芥、琴叶拟南芥、芥菜的相应蛋白相似度最高,其次为 人参 、喜树和野茶树。荧光定量PCR结果显示 ,茉莉酸甲酯能诱导白木香AsHMGS的表达。 关键词 白木香 ;HMGS基因;序列分析;表达分析 中图分类号:Q949.761.1 文献标志码:A doi:10.7525/j.issn.1673—5102.2014.01.011 CloningandGeneExpressionof3-Hydroxy-3-M ethylglutaryl-CoA SynthaseGene(AsHMGS)fromAquilariasinensis(Lour.)Gilg LIUJuan XUYan.Hong YANGYong L1ANG Liang GAOZhi—Hui YANGYun ZHANG Zheng, SUIChun WEIJian—He, (1.InstituteofMedicinalPlantDevelopment,ChineseAcademyofMedicalSciences&PekingUnionMedicalCollege,Beijing 100193;2.Hainan BranchInstituteofMedicinalPlant(HainanProvincialKeyLaboratoryofResourcesConservationandDevelopmentofSouthern Medicine),Chinese AcademyofMedicalSciences&PekingUnionMedicalCollege,Wanning 571533;3.ShangdongUniversityofTraditional ChineseMedicine. Jinan 250355) Abstract HomologousHMGSgenecDNAwasisolatedfromthestemofAquilariasinensis(Lour.)Gilgthrough reversetranscriptionpolymerasechainreaction (RT—PCR)andrapidamplificationofcDNA ends(RACE) technique,andnamedasAsHMGS.ThenucleotidesequenceofAsHMGSgenewas1831bpandcontainedan openreadingframe(ORF)of1398bpencoding465aminoacidswithamolecularweightof51.4kD,andthe theoreticalisoelectricpointwas6.25.RepresentativemotifsofAsHMGSandactivesitewerededuced in the aminoacidssequenceofAsHMGS.Theresultsofphylogeneticanalysissuggested thattheprotein sequenceof AsHMGShadhigh similaritytothatofArabidopsisthaliana,Arabidopsislyrata

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