重症肌无力动物模型的建立.pdfVIP

虫国 丝鱼蕉芏塑皇垒 芏苤查 生 箜 !鲞苤 euroimmunol＆Neurol2010，Vo1．17，No．1 重症肌无力动物模型的建立 包忠蕾 闫晓波 摘要 ： 实验性 自身免疫性重症肌无力 (EAMG)动物模型与重症肌无力 (MG)患者在临床症状、电生理、生 物化学 、超微结构形态学 、免疫学 、生物效应及药效上颇为相似。研究 EAMG动物的发病机制对 MG发病机制 的探索具有十分重要 的意义。此文就 EAMG的各种诱导方法及评定标准进行综述 。 关键词 ：重症肌无力；实验性 自身免疫性 ；动物模型 中图分类号 ：R746．1 文献标 识码 ：A 文章编号 (2010)01—0069—03 重症肌无力 (myastheniagravis，MG)是一种 (未做过手术且未用糖皮质激素)的血清，选用敏感 主要累及神经肌 肉接头 (NMJ)突触后膜乙酰胆碱 的C57BL／6雌性小 鼠，将血清注入小 鼠腹腔或尾 受体(acetylcholinereceptors，AChR)的自身免疫 静脉。 病_1]，主要 由B细胞产生 的乙酰胆碱受体抗体 1．2．2 EAMG 鼠 AChRAb：于 急 性 期 收 集 (AChRAb)介导的体液免疫和 T细胞介导的细胞 EAMG小 鼠血清 ，用 4O (质量浓度)硫酸铵盐溶 免疫及补体协同作用引起。 液沉淀粗制 免疫球蛋 白(Ig)，或用 DEAE柱层析 实验性 自身免疫性重症肌无力 (experimental 得到 IgG，再将 Ig或 IgG稀释于 1mL生理盐水 中 autoimmunemyastheniagravis，EAMG)动物模型 并注射至 Lewis大 鼠颈静脉 。 在临床表现 、电生理、超微结构形态学、组织化学、 1．2．3 抗 AChR单克隆抗体 (mAb)：应用杂交瘤 免疫学 、病理学、生物效应及药效表现等方面与 技术制备抗 AChRmAb并诱导 Lewis大鼠。大 鼠 MG患者颇为相似 ，被认为是研究 MG 的发病机 致敏后首先表现为对外界反应迟钝，其次体质量下 制 、预防及治疗的重要手段 。 降，致敏约 24h有 28 的大鼠出现体质量突然下 1973年 Patrick和 Lindstrom从 加利福 尼亚 降_4]。现 已报道 mAb 35、1TIAbA7、InAbG10 电鳐电器官提取纯化 AChR，并免疫新西兰大 白兔 等[5 均可诱导制作 EAMG动物模型 。 首次获得 EAMG模 型l2]。该文就 EAMG诱 导方 1．3 以合成 AChR 多肽片段作为免疫原 对于 法和评定指标做一综述 。 不同种类动物 ，其抗原决定簇在 AChRa亚基上的 序列也不同。采用人 AChRa亚单位 (HAChR—a) 1 EAMG模型诱导方法 138—167片段免疫兔、HAchR—a195—212片段免疫 1．1 以AChR为免疫原诱导 利用提纯 电鳐 电 SJL小 鼠及 HAChR-一a259-271片段免疫 BALB／c 器官 AChR (TAChR)作为免疫原进行诱导 (经典 小 鼠成功率 高。现 已有文献报道采用 TAChR一 方法)。提纯 AChR 与完全福 氏佐剂 (CFA)按 01【46—162、TAChR—al11-126、TAChR-一a122—138和 1：1N成乳态 ，乳化程度是造模的关键。实验动物 TAChR—a182—198成 功建立 了 EAMG模 型[。 可采用敏感的 C57BL／6小鼠或 Lewis大 鼠，wist— EAMG 鼠模 型还 可 单 独 由从 鼠提取 的 自身 ar大 鼠敏感性较弱_3]。接种部