野生高乌头组织培养及快速繁殖.pdfVIP

生 物 学 通 报 2010年 第45卷 第 1期 野生高乌头组织培养及快速繁殖 张 继 田玉汝 ，。 杨 宁 。 王风霞 I_2 (1甘肃特色植物有效成分制 品T程技术研究 中心 甘肃兰卅I 730070 2西北师范大学生命科学学院 甘肃兰州 730070) 摘要 以野生高乌头的嫩叶和叶柄为材料进行高乌头的组织培养研究。结果表明：高鸟头 的愈伤诱导培养基为 1)MS+2，4一D 4．0mg／L，2)MS+2，4一D3．0mg／L+6一BA0．5mg／L；愈 伤分化培养基为MS+2，4一D ()．2rag／L+6一BA 1．0mg／L+NAA0．5mg／L；不定芽增殖培养基 为 MS+2，4一D 0．2mg／L+6一BA0．5mg／L+NAA0．1mg／L，平均增殖倍数为 5．5；生根培养基 为 1／2MS+IBA 1．5mg／L，生根数 10条以上 ，生根率 95％以上。 关键词 高乌头 组织培养 中国图书分类号 ：Q813．1+2 文献标识码 ：B 高乌头 (Aeonitum smomontanumNakai)是毛茛 叶的高乌头埋于取 自其生长地 的土壤 中．当高乌 科乌头属多年生草本植物 。又名麻布七 、统天袋 、 头根部幼芽出土 ．长至 5cm左右时 ，取其嫩叶及 九连环 ，分布于 四川 、贵州 、湖北西部 、青海东部 、 其 叶柄。 甘肃南部 、陕西 、山西及河北。生于山坡草地或林 1．2 外植体灭菌 将高乌头的嫩叶及叶柄先用软 中。根有毒 ，可人药 ，具有温中止痛 、散寒燥湿 的 毛刷在加有洗洁精 的清水 中轻轻刷洗 ，流水冲洗 作用 ，用于治疗风寒 、关节冷痛或麻木瘫痪 、跌打 干净后 ，放入 2％硫代硫酸钠溶液中浸泡 30min， 损伤等。从高乌头根 中提取的高乌甲素具有较强 然后用 75％酒精消毒 30S，再在加人 1滴 吐温 80 的镇痛作用 ，常用于癌症的治疗 ，并且 因其无成瘾 的0．1％的升汞中表面消毒 8min．无菌水冲洗 6— 无蓄积而优于吗啡和杜冷丁。上世纪 80年代 。西 8次以上 ，用无菌滤纸吸干表面水分。 北师范大学韦璧瑜教授研制的国家一级新药 “氢 1．3 培养基 愈伤诱 导培养基 ：1)MS+2，4一D 溴酸高乌 甲素”镇痛效果好 、无成瘾性而深受消费 4．0mg／L，2)MS+2，4-D3．0rag／L+6一BA0．5mg／L； 者的欢迎 ，该药获国家科技进步三等奖。近年来 ， 愈伤增殖培养基 ：3)MS+2，4一D 2．0mg／L+6一BA 人们对其野生资源的索取 13益加剧 ，使高乌头野 0．5mg／L；愈伤分化培养基 ：4)MS+2，4一D0．2mg／L+ 生资源濒临绝迹 ，虽然高乌头 的引种驯化 已经成 6一BA 1．0mg／L+NAA0．5mg／L：不定芽增殖培养基： 功 ，但 因其繁殖周期长 ，远不能满足生产需要。而 5)MS+2．4一D 0．2 mg／L+6一BA 0．5 mg／L+NAA 且种子萌发率较低 ，易变异 ，性状不稳定 ，不能满 0．1mg／L：生根培养基 ：6)1／2MS+IBA1．5rag／L+活性 足生产需要 。为解决药源问题 ，对野生高乌头组织 炭 300mg／L。以上培养基均附加 30g／L蔗糖 ，0．8％ 培养 ，建立快速繁殖体系。本文建立 的离体培养再 琼脂 ，N一乙烯基一2一吡咯烷N(PVP)2．0g／L，pH5．8。 生体系稳定性好 ，繁殖周期短 对高乌头资源 的 1．4 培 养条 件 培 养温 度 (22±2)℃，光照 强度 保存 、品质改 良，以及生产 中的快速繁殖可能有一 1500～2000Lx，光照时 口12h／d。 定的参考意义，也为进一步进行工业化生产药物