腺病毒介导的脑源性神经营养因子基因脊髓内转移对神经根损伤后细胞凋亡的影响.pdfVIP

第 36卷第2期 兰州大学学报 (医学版) Vb1．36No．2 。 2010年 6月 JournalofLanzhouUniversity(MedicalSciences) Jun．2010 文章编号：1000—2812(2010)02—0001—07 腺病毒介导的脑源性神经营养因子基因脊髓 内 转移对神经根损伤后细胞凋亡的影响 张海鸿 ，王栓科 ，孙正义 ，夏亚一 ，廖维宏2 (1．兰州大学第二医院骨科 ，甘肃 兰州 730030；2．第三军医大学附属大坪医院 野战外科研究所，重庆 400042) 摘 要： 目的观察腺病毒介导的脑源性神经营养因子 (BDNF)基因脊髓 内转移对神经根损伤后细胞 凋亡的影响。方法在大 鼠神经根切断吻合模型基础上 ，通过显微注射法在立体定位仪上将复制缺陷型 重组腺病毒载体fAxCA．BDNF)直接转移至大 鼠神经根损伤部相应的脊髓腹角。术后1、3、7、14、28d 利用DNA末端原位标记、免疫组化 、原位杂交，观察脊髓凋亡细胞 、Caspase一3、bc1．2及 iNOS表达 的改 变。结果神经根损伤诱导Caspase-3和iNOS的表达，触发运动神经元凋亡；AxCABDNF治疗后腹角 运动神经元不但较少表达Caspase-3和iNOS，而且bc1．2表达增加 ，发生凋亡的细胞减少。结论 AxCA． BDNF介导的外源性BDNF基因转染对脊髓运动神经元具有保护作用 ，其作用机制与AxCA—BDNF抑 制 内源性的死亡程序有关。 关键词：神经根损伤；脑源性神经营养因子 ；基因治疗；凋亡 中图分类号：R681．5+4 文献标识码 ：A Effectsofgenetransferofadenovirus-mediated brain- derived neur0trophicfactorintospinalcord on apoptosisafternerverootinjury ZHANG Hai—hong ，W ANG Shuan—ke，SUN Zheng．yi， XIAYa-yi，LIAOW ei—hong (1．DepartmentofOrthopaedics，SecondHospitalofLanzhouUniversity}Lanzhou730030．China； 2．ResearchInstituteofFieldSurgery，AffiliatedHospitalofDaping，ThirdMilitaryMedicalUniversity， Chongqing4o0o4 China) Abstract：0bjectiveToinvestigatetheeffectsofrecombinantadenovirus．-mediatedbrain--derived neurotrophicfactor(BDNF)genetransferintospinalcordonapoptosisafternerverootin- jury．M ethodsNerveroottransectionandreanastomosiswereusedastheexperimentalmode1． Thevectorofrecombinantadenovirus—mediatedBDNF wastransferredintospinalventralhorn throughmicroinjectioninastereotaxicframe．TUNELreaction，immunohistochemistryandsitu hybridizationwereused toinvestigatecellularapoptosisa