MALDI—TOF生物质谱成像技术的进展.pdfVIP

2010年第3期 分 析 仪 器 MALDI—TOF生物质谱成像技术的进展 杨 帆 原 剑 郑俊杰 魏开华 (1．军事医学科学院放射医学研究所，北京，100850；2．北京蛋白质组研究中心，蛋白质组学国家重点实验室，北京，102206) 摘 要 随着 MALDI—TOF等生物质谱仪器性能的提升和应用领域的扩大，基于MALDI的质谱成像技术已成 一一啦述综一一书带蒂带 为研究肿瘤标志物、药物代谢、脂类分布等方面的有力手段 。最新样 品前处理方法 以及 自动化基质喷涂等技术 的发 展，大大提高了质谱成像技术的灵敏度和分辨率。利用原位酶切技术直接鉴定组织切片上的蛋 白质和多肽是 IMS当 前的热点和关键。体内药物代谢物分布、脂类物质分布以及植物组织的质谱成像等研究逐渐成为新的应用热点。本 文较系统地介绍了生物组织质谱成像技术的研究进展。 关键词 质谱成像 基质喷雾器 原位酶切 福尔马林 三维重建 啦 带 业 芥 1 引 言 睾 片和结合磁共振临床诊断等领域有了新的应用。 本文对质谱成像技术的当前热点和最新进展进 基于 MALDI—T0F生物质谱 的组织成像技术 行了综述 。 (MALDI—imaging mass spectrometry，M ALDI— IMS)是一门新兴的分子成像技术 ，对于发现疾病生 2 基质喷涂设备 物标志物和研究药物代谢等方面具有重要意义，并 提高基质喷涂技术 的重复性 ，获得分布均匀和 具有 良好 的临床应用前景 。MALDI—IMS近期 的 大小合适的基质结晶颗粒是提高质谱图像灵敏度和 发展主要在改善灵敏度 、提高分辨率、扩大应用范围 分辨率的重要手段 ，是 MALDI—IMS样品处理 中最 以及标志物的鉴定等方面[1]。灵敏度和分辨率主 重要的环节 ，也是近年来各国研究者和质谱仪器厂 要受激光器频率和能量 、样本切片质量、基质喷涂效 商研究的热点。目前 ，基质喷涂的方式包括手动气 果等因素影响。高频率 (200Hz和 1000Hz)的固体 喷雾、压 电高频振动喷雾、声控微滴喷射和化学打印 激光器已经普遍用于 MALDI质谱 中，可在较短时 机喷射等 。 间内完成一个切片的成像质谱数据采集 ，但可调光 2．1 手动式气喷雾器 束直径 的激光器对于 IMS更有利。切片质量和基 手动式气喷雾器是最早用于基质喷涂的工具， 质覆盖一直是 IMS的一个技术瓶颈 。近年来 ，一些 其原理与常用的喷雾器相似 ，利用气压将基质液滴 研究者和质谱公司开发 了新型基质喷涂设备和技 喷在组织切片上 ，基质能以气溶胶大小 的液滴覆盖 术 ，改善了切片前处理方法 ，大大提高了质谱成像技 在组织切片上。该方法简便易行 ，但人工操作经常 术的灵敏度和分辨率。 会导致每次喷雾的均匀度 、厚度不一致，多次喷雾也 MALDI—IMS起初用于研究组织中的蛋 白质和 容易导致重结晶位置发生变化。近年我们探索了新 多肽分布，近年来研究对象涵盖到了脂类、小分子药 型的质谱成像基质喷雾器 ，其特征在于： 物等，它在生物标志物发现、组织结构研究和药物代 (1)喷雾调节室带有一个可调节气流的入 口和 谢等领域具有重要前景。随着原位酶切技术、三维重 一 个外延形的毛细管喷嘴。毛细管喷嘴为外延形双 构技术的成熟 ，质谱成像技术在福尔马林 固定组织切