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五龙鹅的核型分析.pdf

遗传 HEREDrrAS(Beijing) 6(5):27-291981 五龙鹅 的核 型分析 刘友清 何海晏1)张承延2) (山东大学生物系,济南) 鹅是食草的家禽,生活力强,生长快,体重 可直接制片。用10并吉姆萨磷酸缓冲液 州( 大,饲料经济,管理粗放。所以养鹅自古以来都 6.98)或用10:1的1多碳酸氢钠吉姆萨染色液 是我国农村的一项重要的副业。我国家鹅分布 染色。 广,品种繁多。 本文是以盛产于山东胶东半岛 二()外周血淋巴细胞的培养及其染色体 的一种小型白鹅为研究对象。 它俗称五龙鹅 的制备 (Anserdomestica),以耐粗饲,抗病力强,产卵 用经肝素 (500单位/毫升生理盐水配制) 率高,当地群众形容其下卵多而著称为“鸡鹅”。 湿润过的注射器从成年鹅翼下抽取静脉血进行 由于禽类核型中含有大量的微小染色体, 外周血淋巴细胞培养。外周血的培养可采用全 在制备和观察上存在一些困难,所以禽类染色 血或分离白细胞,但后者分裂指数高,效果较 体的研究远比兽类少得多。目前国内家禽染色 好。分离淋巴细胞是采用自然沉淀法。取全血 体的研究报道比较少,鹅类尚未见有报道。国 3-4毫升,加人肝素50单位/毫升,植物血球凝 外有关这类的文献见有:Oguma(1942),Ya- 集素100微克/毫升,在4℃冰箱中,垂直静置 mashina(1950),Bhatnagar(1965),Itohetal 2小时,使红血球沉集。然后以300-400rpm (1969)等曾对家鹅染色体作过报道。 本文采 离心10分钟,吸取富含淋巴细胞的上清液进行 用外周血淋巴细胞培养与胚胎组织制备染色体 培养。培养液用含有20关小牛血清的TC-199 的方法研究了五龙鹅的核型。 培养液,肝素25单位/毫升 PHA200微克/毫 升,并按常规加人双抗,声 调至7.2。每一培养 材 料 和 方 法 瓶分装配置完全的培养液,毫升,全血 0.3毫 一()胚胎组织制备染色体 升或分离的白细胞悬液 。.2毫升,置于39士10C 实验材料取自山东莱阳县五龙鹅种鹅场孵 培养箱中培养70小时。在终止培养前3.5-4小 育至20日龄左右的鹅胚尿囊腔,每只注射70 时,加人秋水仙素使最终浓度为0.1微克/毫 微克的秋水仙素后,继续培养4-5小时,取出 升。培养结束,离心收集细胞,然后同前法制备 胚胎的脾、肾、肝等组织,用无钙镁的汉克氏 染色体标本。 液洗涤,用眼科弯头解剖剪将组织剪碎制成匀 制备好的染色体片子,在油镜下选择分散 浆,再用汉克氏液洗涤。然后加人3-5倍量的 良好的中期分裂相100个左右进行观察及统计 0.25多胰蛋白酶溶液 p(H调至7.2)。在370C 其2,数目,并从中选择 10个左右分散好,二条 水浴中消化20-30分钟或者放在4℃冰箱中 单体分离,边缘清晰的中期分裂相进行显微摄 冷消化3-4小时。然后离心除去消化液,加人 影,按常规方法进行同源染色体的配对、测量和 0.075MKCl溶液,进行低渗处理20分钟。然 后按常规的固定、滴片、空气干燥法制备染色体 DuYouq:ngetal.:KaryotypeAnalysisofWulong Geese(Anserdomestics) 标本。骨髓组织无须消化处理,经过低渗,即 1)广州师范学院。 2)山东省医科院。 27 衰I 五龙鹅二倍体细胞染色体数目统计 二倍体染色体数目 性 别

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