唾液中酸性富含脯氨酸蛋白遗传多态性的进一步研究TheFurtherStudyofGeneticPolymorphismso.pdfVIP

遗传 HEREDITAS(Beijing)17(5):14-161995 睡液中酸性富含脯氨酸蛋白遗传多态性的进一步研究 庞 濒 贾静涛 胡忠国 李庆生 （中国医科大学法医系血清学教研室，沈阳110001) 摘 要 本文用聚丙烯酞胺凝胶等电聚焦技术，调查了中国辽宁地区274名个体酸性富含脯氨酸蛋白二位 点上共 6种等位基因频率的分布．PRHI*1=0.0511,PRHI*2=0.1715,PRHI*4=0.7610, PRHI＊6=0.0164;PRH2＊1=0.8157,PRH2＊2=0.1843,Hardy-Weinberg定律进行吻合度检验，理论 值与期望值高度一致．本研究还就我们调查的数据与Maeda等提出的新的遗传学说进行检验吻合，证明 了这一理论适用于中国汉族群体，同时提供了一组新的、不同于作者先前用旧命名法报道的遗传学数 据．本次研究还同时检出了另两种酸性富含脯氨酸蛋白Au和Av，其中Au(+)出现率为2.55%;Av(+)为 0.36. 关链词 酸性富含脯氨酸蛋白，多态性，PAGIEF,基因频率 TheFurtherStudyofGeneticPolymorphismsofSalivaryAcidic Proline-richProteins PangHao JiaJingtao HuZhongguo LtQingshcng (FacultyofForensicMedicine,ChinaMedicalUniversity,Shenyang110001) 人唾液富含脯氨酸蛋白P（roline-richProteins,PRPs）约占唾液中蛋白质的三分之二，并且显示出众多的遗传 多态性 2〔)．这些多态物质的产生是由6个基因位点构成的一个大的人类唾液富含脯氨酸蛋白多基因家族所 决定③．1985年，Maeda等进一步将这一大家族分成二个小家族，其一：PRHI和PRH2二位点上产生的酸性富 含脯氨酸蛋白(A（PRPs)；其二：PRB1-PRB2四位点上产生的碱性和糖基化富含脯氨酸蛋白4（)．自从1973年 Azen等发现了第一个酸性富含脯氨酸蛋白的富含脯氨酸蛋白P（roline-rich,Pr）系统多态性以来 5)〔，又发现了多 种酸性富含脯氨酸蛋白多态系统：Db(1974,Azen),Pa(1975,Friedman),PIF(1981,Azcn),As(1986,Minaguchi）及 At,Au,Av(1988,Shintani)．作者曾经对中国人群中Pr,Db,Pa和PIF等4种酸性富含脯氨酸蛋白的多态性分 布情况用辽宁地区样本进行了调查报道 ’（）．本文利用腮腺液样本，采用超薄层等电聚焦技术，对包括作者先前检 出的4种在内的共7种酸性富含脯氨酸多态蛋白在中国辽（宁地区）汉族人群中的分布情况进行了研究，同时对 PRHI位点上的酸性富含脯氨酸蛋白基因按新遗传学说进行了阐述． I材 料 和 方 法 1.1样本的采集 将双室杯的内室贴住一侧腮腺导管开口处，口含维生素C丸刺激腺体分泌，即可得到清澈的水状腮腺液．约 取0.5ml，分装，放于一30℃冰箱备用． 1.2聚丙烯酞胺凝胶板制作 1.2.1制 胶 制备100x70x0.2mm 胶板，所灌制凝胶总液量为 1.5m1.聚丙烯酞胺浓度(T)为7.0%，交联度 (C）为3.0%，尿素浓度为30%,Ampholine浓度为4.0 ，其中pH3.5-5.0和pH4.0-6.5=1:1(V/V)，加过硫酸 钱后，室温下聚合，放冰室中保存备用． 5期 庞 濒等：唾液中酸性富含脯氨酸蛋白遗传多型性的进一步研究 巧 1.2.2聚 焦 使用2219MultitempH冷却循环器;2297-Macrodrive5恒功率电栋(LKB);2217Multiphorll电泳 槽(LKB).阳极条浸以0.5mol/LH3PO4,阴极条浸以0.5mol/LNaOH．首先将凝胶板进行预聚焦，电压为 1800V，电流 lOmA．功率2W,循环水温4C1.30-60分钟后用3x6mm滤纸条浸取腮腺液样本，直接将其加在 距阴极端 lcm的胶面上，0.5-1小时后提高功率至4W,恒电压后，继续电泳20-30分钟，共约3.5小时． 1.2.3谱带显现