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生物防治
抗根癌菌剂2号工厂化生产关键技术研究+
李金云h‘王金利2王建辉1颜容2王慧敏h”薛洋2
根癌病是根癌土壤杆菌(Agrobactium
spp.)引起的一种顽固性病害,此菌寄主范围广,
可侵染93科331个属643个种的植物,包括果树、林木、花卉等多种双子叶植物和部分裸子
植物,在生产上造成非常大的损失。调查表明在我国多数种植根癌病寄主植物的地区根癌病均
有不同程度的发生。目前生产上明显出现为害的有樱桃、桃树、李子、杏树、葡萄、苹果、梨
树、海棠、山楂、核桃、杨树、樱花、玫瑰、月季、啤酒花等果树、林木和花卉,不同地区发
生情况不同。根癌病的症状表现是在植物的根部(有时在茎部,所以也称冠瘿病)形成大小
不一的肿瘤,初期幼嫩,后期木质化,严重时整个主根变成一个大肿瘤。病树树势弱,生长迟
缓,产量减少,寿命缩短,甚至死亡,影响苗圃苗木的质量和成树的生长。重茬苗圃发病率在
20%一100%之间不等,发病重的甚至造成毁园。根癌病菌可较长时间的存活在土壤中,从植
株的伤口侵入,随苗木的调运进行远距离传播,是土壤传播加苗木传播的细菌性病害。此病菌
的致病方式是将其致病质粒上的一段DNA整合到植物的染色体DNA上,随着植物本身的生长
代谢来刺激植物细胞增生形成肿瘤,而病原细菌的细胞并不进入植物的细胞。
鉴于根癌菌来源于土壤,所以防治的时间应选择在种子或植株接触未消毒的土壤之前进行
种子或苗木的处理,从根本上阻止根癌菌的侵入。伤口是根癌菌唯一的侵染途径,所以保护伤
口是最好的防治切人点。根癌菌具有非常特殊的致病机制,一旦有根癌症状表现就证明T-DNA
已经转移到植物的染色体上,再用杀细菌剂杀细菌细胞已无法抑制植物细胞的增生,更无法使
肿瘤症状消失。目前,利用抗根癌菌剂对植物根癌病进行生物防治是非常实用可行的方法。中
国农业大学植物病理学系细菌课题组利用引进的国外K84菌株研制成抗根癌菌剂1号,已经成
功用于防治我国多种果树根癌病;并且,分离、筛选到一些具有自主知识产权的根癌病生防细
菌,可以弥补国外K84菌株的抑菌谱缺陷。本项目以其中一株高效菌株AE进行研究,以形成
可以防治多种植物根癌病的抗根癌菌剂2号,解决国外K84菌株只对核果类果树根癌病有效的
问题和局限。以活菌量和抑菌活性为指标,通过单因子和正交试验,从18种液体培养基筛选
得到1种相对最适的发酵培养基。明确了在小型发酵罐的发酵条件:温度26~29℃,接种量
附剂,甲基纤维素和黄原胶可作为防护剂和稳定剂,并将发酵终产物制成了10×108
cfu/g的
菌剂。该菌剂在室温(20~25℃)保质期约为100天。在不同地区的田问应用示范证明该菌剂
对根癌病的防治效果在70%以上,并且防治效果与菌剂的应用方法有密切关系。
·基金项目:北京市科技计划项目(D0705002040191)。
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