蜂胶预防根面龋作用与实验研究.pdf

中文摘要 蜂胶预防根面龋作用的实验研究 摘 要 目的：根面龋是老年人的口腔常见病，老年患龋率为 73．0％，充填率30．6％，且根面龋多于冠面龋。患龋老年人群 中只有30％接受治疗，70％未接受治疗。因此，根龋病是老 年口腔疾病防治的重要内容之一。在菌斑细菌的作用下，牙 骨质表层下无机物脱矿，有机物分解，牙骨质结构和完整性 遭到破坏软化成根龋。关于根面龋致病菌的观点至今仍有分 歧。对致龋微生物生物学特性的研究结果，提示变形链球菌 是最重要的致龋菌，对根面龋的发生起协同作用。早期采用 的抗生素、氟化物防龋等在临床应用上有诸多局限性，尚需 要探讨一些新的有效的预防方法。蜂胶成分非常复杂。其中， 以黄酮类的含量最高，也是蜂胶的精华所在，约占萃取物的 40％．50％。入们发现它具有多种药理活性，包括抗氧化活性、 抗炎、抗病毒、免疫调节以及抗肿瘤作用。目前蜂胶在治疗 口腔粘膜病、防治牙周病中效果明显。蜂胶失活牙髓、消毒 牙根管对口腔软硬组织无任何副作用。亦可用于皮肤科、妇 科、消化内科等多种疾病的治疗中，适用范围广泛。本文将 探讨蜂胶防龋效果及其可能的防龋机制，为蜂胶在预防根面 龋临床应用提供实验基础。 方法：1茵悬液的制备：将复苏48h的变形链球菌种于 羊血培养基微需氧条件下3712恒温箱培养24h。挑选菌落， 传代培养3次，涂片检查细菌生长良好，确定为变形链球菌 后将细菌转种于牛心汤培养液中。微需氧环境37(2恒温培养 中文摘要 24小时。使用紫外分光光度计用无菌生理盐水调整为OD=I．0 的菌悬液用于实验。 solution简称：P’s)的制各： 2蜂胶醇溶液(propolis’S 将1009／L醇溶性北京蜂胶提取物按1：2的梯度逐级成倍稀释， 即制备7．59／L，3．759／L，1．8759／L种浓度蜂胶醇溶液。 3体外抑菌实验：采用纸片琼脂扩散法，使用卡尺测量 每组试剂周围抑菌环大小。每个试剂组作5份标本。 4收集因牙周病导致的ⅡI度松动磨牙40颗，体视显微镜 下观察(放大10倍)无裂痕缺隙，无根面龋坏，刮除牙结石 及根面牙周膜。用0．Imol／LPBS液在超声清洗器内清洗5min， 干燥，置10％甲醛溶液中消毒4C冰箱保存备用。所有牙用金 刚砂盘从中央窝处沿颊舌向面纵向剖开，以牙冠近(远)中 质块，去离子水超声清洗12rain，吹干试验区中部暴露形成 5mmx5mm的实验开窗区。其余部位涂布指甲油。将预备好 的牙骨质块随机分成5组(每组15个标本)。开窗区分别用 化钠溶液，去离子水(deionizedwater简称D’w)浸泡约5min， 自然凉放30min后，放回37℃人工唾液恒温水浴，每天3次， 每组各于5d、10d、15d随机取出5个标本去离子水冲洗处理 P’s， 4min室温下干燥。将7．59／LP’s，3．759／LP’s，1．8759／L NaF，D’w处理过的牙标本分别悬吊上述菌液2ml中在 209／L 微需氧条件下培养48h后取出，脱矿液留作原子吸收分光光 度计测ca2+溶出量。 5扫描电子显微镜观察：用高速金刚砂盘喷水条件下将 P’S处理过的牙标本每个样本于开窗中分 脱矿15d后，7．59／L 中文摘要 切成两半，一半牙骨质块立即放A．2．5％戊二醛内预固定24h， l％锇酸内后固定2h。用PBS缓冲液漂洗，50％至无水乙醇逐 级脱水干燥后镀金膜，扫描电镜观察标本并拍照。 6光镜观察：将剩余脱矿牙标本以4％多聚甲醛溶液固定 远中向连续组织切片，行FIE染色，观察标本并拍照。 P’s 结果：(1)随蜂胶浓度降低，抑菌环直径变小。7．59／L 组，3．759／L 测定结果：蜂胶醇各浓度组均有抑制牙骨质脱矿的作用。作 用5天的各浓度组与D’W组相比，牙骨质C