鸡Robo1基因在卵巢中的mRNA表达及PCR-SSCP多态性分析.pdfVIP

22 ofthe1 3“National onAnimalGeneticMarkers Proceeding Symposium 姜建萍，徐日福‘，王志贤，包艳波，秦宁，杨雨江 吉林农业大学动物科技学院分子生物学与动物遗传育种实验室，长春130118 引言 and 为神经元轴突导向因子在果蝇中发现的。Dickinson 号通路在细胞分化调控过程，尤其在卵巢的发育过程中，起着至关重要的作用，其通过 类固醇激素的调节，调控人类生殖系统和组织的细胞功能，并且，在人黄体周期中发现 Slits和Robos呈特异性和差异性表达。而Robo受体家族在细胞分化过程中的功能研究主要 研究则以蛋鸡海兰白和地方大骨鸡为实验材料，对Robol基因在鸡卵巢中的mRNA表达水 育过程中不同时期的时空表达模式等打下基础。 材料方法 选取饲养条件一致的大骨鸡、海兰白鸡，分别采集18周龄时的卵巢组织，快速收 集，并迅速置于液氮中冷冻保存，同时提取总RNA，反转录合成eDNA。根据NCBI Premir5．0设计 GenBank中已收录的鸡Robol基因mRNA序列，通过引物设计软件Primier 因在两个不同鸡品种卵巢中的mRNA表达水平差异。同时，对Robol基因片段的PCR- SSCP多态性进行分析。 结果 长度为139bp，在18周龄时，两品种鸡卵巢组织中均有表达。其中，海兰白鸡中的Robol 基因型：AA、AB、BB、CC和CD。对本大骨新品系群体的基因型频率和等位基因频率 分析可见，杂合基因型AB和CD是优势基因型，等位基因B和等位基因C为优势等位基 因。 讨论与结论 家禽的产蛋性能(产蛋量、产蛋强度及性成熟等)是鸡的最主要经济性状之一，除 环境和饲养管理等因素的影响外，母鸡卵巢中卵泡的发育状况是决定产蛋性能的重要因 素。研究发现，Slit／Robo信号通路在血管丰富的卵巢发育过程中，不仅调节这其内皮细 胞的迁移、分化，而且参与其血管新生的调控。通过对人类Slit／Robo信号通路及其 Robol基因的研究，表明该信号通路在黄体溶解过程中起着关键性作用，进而影响卵巢的 发育情况。分析本实验结果显示，高产海兰白蛋鸡卵巢组织RD6DJ基因mRNA表达量显著 高于大骨鸡(P0．01)，此差异表达水平可能与Robol基因参与卵巢组织中的卵泡发育 的调控密切相关。进行一步的相关研究正要进行中。至于Robol基因片段的PCR-SSCP多 态性是否影响着卵巢组织中的卵泡发育程度、进而对鸡的产蛋性有一定的影响，尚有待 于其与产蛋性状的关联分析和遗传效应验证。 关键词：鸡，Robol基因，多态性分析，mRNA表达 致谢：本研究受国家高技术研究发展计划重点项目(2011AAl00305)，国家现代农业产 业技术体系建设专项基金(CARS一42一Z04)和吉林省教育厅重点科技计划项目(2008— 59)资助。 }通讯作者：E—mail：rufusxu@yahoo．com．cn。