宁心红杞胶囊有效部位群的提取分离及药效筛选.pdfVIP

2011 2011年7月 中成药 July 第33卷第7期 ChineseTmditionalPatentMedicine V01．33No．7 宁心红杞胶囊有效部位群的提取分离及药效筛选 勇 维1， 韦 敏1， 耿茂林1， 马 红2， 吕 晔¨ (1．江苏省中国科学院植物研究所，江苏南京210014；2．南京中医药大学，江苏南京210029) 摘要：目的提取分离宁心红杞胶囊全方有效部位群，以筛选和确定活性部位。方法对宁心红杞胶囊全方提取物经大 孔树脂柱进行醇水梯度洗脱分离；以SD幼年大鼠卵巢颗粒细胞增殖率、颗粒细胞雌孕激素分泌能力为活性指标对各分 离部分进行药效筛选。结果经分离得到的55个流份样品中，有21份样品对卵巢颗粒细胞损伤具有修复作用，其中 16、17号样品和38—41号样品的修复作用与模型对照组比较具有显著性差异。16号和38、39号样品具有较显著提高 了颗粒细胞雌孕激素分泌能力；对药效显著部位样品定性分析显示16、17号样品主要为多糖类成分，38、39号样品主要 为黄酮类成分。结论宁心红杞胶囊经醇水提取分离和活性跟踪筛选后得到了药效显著的有效部位，主要是多糖类和 黄酮类成分，这两类成分在修复卵巢颗粒细胞损伤和提高雌孕激素分泌能力方面各自具有不同的作用。 关键词：宁心红杞胶囊；颗粒细胞；有效部位群；药效筛选 中图分类号：R284．2 文献标志码：B 文章编号：1001—1528(2011)07．1255-03 宁心红杞胶囊是由枸杞、红花等制成的纯中药制剂，于 胶(青岛海洋化工厂)；无水乙醇、三氯化铝、甲醇、三氟乙 2006年获得专利批准(专利号：Z9)。经10余年酸、浓硫酸均为分析纯，购于上海天莲精细化工有限公司和 的研究及临床使用，对于围绝经期出现的各种症状已取得确 南京化学试剂有限公司。 1．3 550 主要仪器 酶标仪Bio-Rad(Model 切疗效[1引。动物实验已证实宁心红杞胶囊对卵巢及性腺系 Microplate 统有活性，且主要表现在改善卵巢颗粒细胞的凋亡和衰老方 面，具有调整生殖内分泌系统和稳定激素内环境的作 司)；TL一18M型台式高速冷冻离心机(上海离心机械研究 用M。0|。然而，关于其有效成分的分离研究方面尚未有相关 报道，为了明确其作用的有效物质基础，有必要对宁心红杞 AE 胶囊复方进行药效分离研究。本研究对宁心红杞胶囊采用 兴科技发展有限公司)；METFLER240分析天平(瑞士梅 植物化学方法取得其各提取部位，通过卵巢颗粒细胞体外衰 特勒公司)。 2实验方法 老模型，以卵巢颗粒细胞增殖率、雌二醇(E：)及孕酮(P)分 泌能力为活性指标进行药效学跟踪筛选，得到了活性部位， 2．1 宁心红杞胶囊各溶剂提取物制备全方浸膏经过D 并且确定了药效显著部位的化合物类型。 型大孔吸附树脂，分别以水、含10％、30％、50％、70％、95％ 1实验材料 乙醇的水溶液梯度洗脱，得到分离洗脱样品。 1．1 2．2宁心红杞胶囊全方各溶剂提取物的药理筛选 实验动物22～27日龄雌性SD大鼠，清洁级，由上海 2．2．1卵巢颗粒细胞的制备取22—27日龄雌性大鼠，皮 西普尔．必凯实验动物有限公司提供，许可证号：SCXK(沪) 66 2008-0016。 下注射PMSGIU／只，常规饲养48h后颈椎脱臼法