血管内皮生长因子和鼻咽癌关系的研究.pdfVIP

血管内皮生长因子与鼻咽癌关系的研究 中南大学湘雅医院肿瘤科(410008) 姜武忠廖遇平赵素萍伍海军魏瑞周蓉蓉张静 鼻咽癌患者的死亡原因主要是转移和(或)复发。探讨鼻咽癌的转移复发机制，了解NPC复发、转 移倾向，对提高NPC患者生存率具有重要意义。血管内皮生长因子是作用最强的促血管生长因子之 一，与恶性肿瘤的生长、转移、复发和肿瘤新生血管形成密切相关。本研究对108例NPC放疗前活检组 织标本，应用免疫组织化学技术检测VEGF基因蛋白在NPC组织中的表达情况，同时采用双抗体夹心 作为对照，探讨VEGF的表达与NPC分期、放疗敏感性、生存率、转移复发及VEGF基因蛋白在组织中 的表达与血清中VEGF表达的关系。旨在为判断NPC的恶性程度和生物学行为提供客观指标。 材料与方法 一、临床情况 (KPS)评分70，无放疗禁忌；有条件接受系统放疗及其他对症支持治疗，且顺利完成治疗者；有完整病 历资料；放疗后随访5年以上。 例无颈淋巴结转移，75例有颈淋巴结转移。另取lO例疑癌患者作为对照。男6例，女4例，年龄18—65 (平均45)岁，经病理切片证实为慢性鼻咽炎。108例鼻咽癌患者均给于根治性放疗，采用6MVx线或 60C01线常规分割照射，5次／周，2Gy／次，鼻咽照射设双侧面颈联合野+耳前野，有颅底骨质破坏者加 结阴性预防照射DTSO一56Gy，5—6周完成。鼻咽原发灶采用6MVX线或60c01线垂直照射，颈切线 剂量46Gy后电子线补量至DT60—70Gy，颈髓及脑干剂量控制在44cy以下。 3．疗效观察：放疗结束时鼻咽部原发灶和颈部淋巴结消退情况及放疗后6个月CT评价鼻咽原发 灶消退情况，按WHO实体瘤客观疗效标准评定，完全缓解(completeremission，ca)：所有可见病变完全 消失，并至少维持4个月以上；部分缓解(partial 个月以上。放疗结束时评价放疗疗效，放疗后1年内每3个月随访1次，放疗后l一3年内每半年随访1 次，3年以上者每年随访1次。 4．随访：随访方法为定期复查，随访期5年，随访病例中有3例失访，随访率为97．1％。随访内容 包括间接鼻咽镜检查、鼻咽cT扫描、肝脏B超、肺部照片、血清病毒壳蛋白抗原一免疫球蛋白A(viral capaidantigen—immunoglobulinA，VCA—IgA)检测。 =、试验情况 I． 免疫组织化学技术检测鼻咽癌组织中VEGF蛋白水平 Zymed公司产品，购自福建迈新公司。 1．2免疫组织化学S—P染色法：按试剂盒说明步骤进行，VEGF工作浓度为I：50。显微镜下观察 细胞浆或细胞膜上呈棕黄色染色为阳性细胞，设已知鼻咽癌细胞的阳性标本切片作阳性对照，PBS代替 一抗作阴性对照，每一切片随机选择4个视野(×loo)，计数500个癌细胞阳性细胞百分率．阳性细胞 ·149· 分，51％为强阳性(+++)、记3分；着色分为：不着色记0分，浅为1分。中为2分，探为3分。 2． 酶联免疫吸附实验检测血清中VECF蛋白水平 血清中VEGF蛋白的检测采用酶联免疫吸附法进行，全部患者均在放疗前留取外周静脉血4m1．在 4℃3000f／rain离心10 迈新公司(美国Zymed公司产品)。试剂盒包括鼠抗人VEGF多抗，羊抗鼠单抗以及辣根过氧化物酶等， 严格按试剂盒说明进行操作。显色后用酶标仪(450 mm)比色，根据校正曲线求出VEGF数值，所有标 本均进行双管检测。 3．统计方法 使用SPSSIO．0统计软件，两样本率的比较采用x2检验，计量资料采用t检验和方差分析。生存率 作为显著性检验水准。 结 果 1． VEGF基因蛋白在鼻咽癌组织中的表达与临床特征的关系 2． 在NPC组织中YEGF表达与放疗敏感性、复发率、远处转移率及生存率的关系 56(P0．01)。 ’ 3． VECF基因蛋白在鼻咽癌血清中的表达与临床特征的关系 ELISA法检测血清VEGF蛋白水平，结果显示NPc患者血清VEGF水平为466．45ng／L，明显高于 正常人65．23