利用蛋白质芯片技术筛选矽肺早期诊断血清特异性生物标记物.pdfVIP

中文摘要 、 利用蛋白质芯片技术筛选矽肺早期诊断 血清特异性生物标记物 摘 要 矽肺是由于长期吸入游离二氧化硅粉尘所引起的以肺 间质纤维化为主的全身性疾病，危害人群相当广泛。目前对 矽尘暴露人员尚无有效的早期诊断(筛检)和健康监护的方 法，一经传统的后前位胸片确诊为矽肺，病人肺部的纤维化 进程己无药物可逆转。因此，寻找用于矽肺早期诊断和肺纤 维化进程评价的生物标记物对预防、治疗乃至最终消除矽肺 具有重要意义。后基因组时代蛋白质芯片技术的出现极大地 推动了蛋白质组学的发展，该技术通过不同的表面修饰而选 择性地捕获蛋白质，具有快速、简单、敏感、样本用量少等 优点，尤其适合应用于对疾病特异性生物标记物的筛选研 究。矽肺的发生、发展过程中存在着许多蛋白质在成分和数 量上相应的改变，这些蛋白质的存在使得矽肺生物标记物的 筛选成为可能。 目的：利用蛋白质芯片技术，筛选有助于早期诊断矽肺 的血清特异性生物标记物，旨在为矽肺的早期诊断提供依 据。 方法：同期统一技术手段采集研究对象血清，严格按照 纳入标准，分别得到研究对象含矽尘暴露人员0组、o。组、 I期组及正常对照组各20份血清置趣O℃冰箱冻存备用。将 处理好的血清样品加样于美国赛弗吉公司生产的新一代弱 中文摘要 读机，自动收集蛋白质峰，设有意义峰的最低信噪比为5， 最小峰闽值为30％。以赛弗吉公司相应的软件Ciphergen ProteinChip BioMarker Wizard软件对不同组相同质荷比(M／z)的蛋白 质相对含量数据进行统计分析，寻找差异表达的标志分子。 结果：l研究对象的基本情况：各组选择研究对象的年 龄、血压、肝功能、血常规检查等在统计学上的差异无显著 性(P0．05)：而反映肺功能的指标肺活量和各组矽尘暴 露人员的接尘工龄在统计学上的差异均有显著性(P0．05)。 2蛋白指纹图谱的差异表达：矽尘暴露组与正常对照组 正常人的血清中差异表达，相对含量变化具有统计学意义(P O．05)。其中M／z为2746的分子在正常人血清中低表达， 在矽尘暴露人员血清中高表达，相反，M／z为4184、5914 和6122的分子在正常人血清中高表达，在矽尘暴露人员血清 中低表达；矽尘暴露人员各组间对比，发现M／Z为2938、 尘暴露人员血清中差异表达，相对含量变化具有统计学意义 暴露人员0组和0+组中均为低表达，而在I期组中高表达。 结论：研究对象的选择符合实验要求，具有可比性；M 能是矽肺病人与正常人的鉴别诊断指标，而M／Z为5071、 5483和5640的分子的相对含量变化可能成为矽肺的早期诊 断指标；蛋白质芯片技术对于发现和筛选血清中矽肺的标志