山羊FSHR基因第10外显子单核苷酸多态性及其和双羔性状间关系的研究.pdfVIP

吉林畜牧兽医增刊 试验报告 山羊FSHR基因第1O外显子单核苷酸 多态性及其与双羔性状间关系的研究 赵艳丽，李向军，王捷，姜怀志 (吉林农业大学动物科技学院，吉林长春130118) 【摘要】分别选择遗传性能稳定的2．5岁的经产双羔、单羔辽宁绒山羊母羊，并以萨能奶山羊为对照。 465～l695 对FSHR基因第10个外显子的l bp碱基区段进行SNP分析．利用PCR法扩增FSHR第lo个外 显子的目的片段．利用PcR—sscP法对PCR扩增的目的片段进行单核苷酸多态性分析。结果表明：辽宁 绒山羊FSHR基因第10个外显子突变率较大．并且其突变发生在第l584个碱基．由c—T。说明FSHR基 因的第10个外显子可以作为双羔性状的标记基因． 【关键词】山羊；FSHR；单核苷酸多态：双羔 繁殖性状是动物的重要经济性状之一．产仔率则是繁殖性状中最重要指标之一。山羊是单胎家畜。 这在生产上是极为不利的．因为家畜的产仔率的高低直接与生产成本相关。因此．通过提高产仔率来降 低家畜的生产成本一直是人们追求的育种目标之一。而家畜的产仔率则与卵巢的排卵率高低相关(雷 雪琴。2001)【l】。众所周知。动物的卵泡生长、发育、分化、成熟直至排卵是受脑垂体分泌的促卵泡素 能和结构上分为跨膜域、胞外膜和胞内域3个部分．最显著的特点是跨膜域在细胞膜上来回折叠形成7 段跨膜域。FSHR基因的10外显子中．第10个外显子编码胞内域和跨膜域．胞外域则由第l一9外显子 编码【3．5】。由此可见第10个外显子十分重要．VanVleck(1991)【6】在研究牛的双胎性状时发现．双胎与 排卵的遗传相关接近1。oo．认为与包括FSHR在内的排卵有关的基因可以作为研究双胎的候选基因。 牛、波尔山羊、肉牛、猪等家畜多胎关系进行了探讨。 辽宁绒山羊与其它绵羊、山羊品种一样．属于季节性繁殖的低繁殖力家畜．繁殖效率低．因而使该 羊产业化、规模化发展受到了制约。因而提高其繁殖效率也就成为研究热点。自20世纪80年代以来辽 宁绒山羊在系统的本品种选育过程．出现了一部分产双羔的群体．目前产双羔母羊比例约占可繁殖母羊 的20％．而且具有稳定的遗传特性．但是其遗传机制不清楚。因此以辽宁绒山羊和奶山羊的双胎母羊 468—1695 为试验材料．对FSHR基因第lO个外显子的l bp共230个碱基区段进行单核苷酸多态性 nuclcotidc (single 因作为候选基因标记辽宁绒山羊双羔性状的可行性．以便为辽宁绒山羊双羔品系的选育中提供参考 依据。 1材料与方法 1．1 材料 试验动物均为2．5岁经产的辽宁绒山羊母羊，其中双羔母羊15只，产单羔母羊15只(均经系谱审 查和已有生产记录的母羊)。另外选取产双羔和单羔萨能奶山羊各15只(均为2．5岁)作为对照试验 动物。所有的动物均颈静脉采血5mL，并用肝素钠抗凝，一20℃保存。所用的分子生物学试剂主要有 ．99． 试验报告 吉林畜牧兽医增刊 限制性内切酶，Taq Kit购自博大科技有限 菌酶、Tris、PBS、水饱和酚，氯仿，dNTP均购自北京鼎国生物公司；Geneclean 公司。 1．2方法 1．2．1 基因组DNA的提取与纯化 按萨姆布鲁克(2002)的方法进行‘121。 1．2．2PCR反应引物设计 参考Rahal 由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。 7 GAAAGATGGCATACC3 上游引物：57ATGACGCTG GGAC37