血管生成素在人毛囊的表达和其促毛发生长的作用研究.pdfVIP

中华医学会第十四次全国皮肤性病学术年会·实验 烫发染发对头发的损害及护发素对其修护作用 曹蕾范卫新王磊 南京医科大学第一附属医院皮肤性病科(南京210029) 目的：通过定量的方法研究烫发染发对头发的影响以及洗发香波和护发素对其作用。方法：利用扫 描电子显微镜(SEM)观察烫发染发前后及用护发香波处理后头发表面形态，根据毛小皮细胞与毛干之 间的夹角为每个毛小皮赋予不同的分值，通过自身对照对结果进行评估。结果：刚处理过的头发毛小皮 评分较处理前增高。用护发素处理一次，之后的三个月内，继续使用洗发香波+护发素组的毛小皮评分 低于单用洗发香波组。结论：烫发染发会对头发造成不同程度的伤害，烫发染发后早期使用正规洗发香 波和护发素可对处理后的头发起到修护作用。 血管生成素在人毛囊的表达及其促毛发生长的作用研究 周乃慧范卫新李梅云 南京医科大学第一附属医院皮肤科(南京210029) 目的：探讨血管生成素在人毛囊中的表达及其对毛发生长的影响。方法：(1)分别利用lit—PCR 和免疫荧光检测血管生成素mRNA和蛋白在人毛囊中的表达。同时，ELISA检测血管生成素蛋白在体 外培养的人毛囊上清中的表达，结合人毛囊的生长曲线，比较培养不同时间内血管生成素的表达与毛囊 生长长度的关系。(2)采用两步酶法分离培养原代的人毛乳头细胞，在毛乳头细胞水平，lit—PCR检测 血管生成素mRNA的表达，westernblot和免疫荧光检测血管生成素蛋白的表达。同时，ELISA检测血管 生成素蛋白在毛乳头细胞上清中的表达。(3)利用松香／石蜡拔毛法拔除C57BI／6小鼠背部毛发，诱导 蜡拔毛法拔除C5781_,／6小鼠背部毛发，诱导毛囊同步进入生长期，拔毛后第。天在小鼠背部皮内注射 I蝣重组人血管生成素，连续7天，对照组注射0．1％BSA—PBS。第10天观察注射部位皮肤的颜色和 血管形成，同时取皮肤组织HE染色后，测量皮肤厚度和生长期VI毛囊比例。(5)在体外培养的人毛囊 增殖，流式细胞仪检测细胞周期。同时，将血管生成素的真核表达载体pEGFP—ANG转染人毛乳头细 胞，设立转染pEGFP—C2组和单纯转染液组作为对照，转染后培养48小时，MTr法检测细胞增殖。 (7)在体外培养的人外毛根鞘细胞中，加入不同浓度的重组人血管生成素(0—200ng／mL)，加或不加抗 达血管生成素mRNA，免疫荧光显示人毛囊的毛乳头和真皮鞘表达血管生成素蛋白，而外毛根鞘、内毛 根鞘和毛母质不表达血管生成素蛋白。ELISA检测结果示体外培养的人毛囊上清中表达血管生成素蛋 白，在培养的第2个48小时内(第2—4天)血管生成素的表达和毛囊的生长长度均达到最高。(2)lit —PCR检测发现培养的人毛乳头细胞表达血管生成素mRNA，Westernblot显示人毛乳头细胞表达 ．--～360．．．—— 中华医学会第十四次全国皮肤性病学术年会·实验 14kDa的血管生成素蛋白。免疫荧光进一步证实表达血管生成素蛋白表达在人毛乳头细胞的细胞浆 内，而不表达在细胞核内。毛乳头细胞培养48小时后，ELISA检测发现培养上清中血管生成素蛋白的 的表达具有毛发循环依赖性的特征，表现为生长期早期逐渐增加，生长期中期到晚期迅速增加，到生长 期VI(拔毛后12天)达到高峰，以后在退行期早期迅速下降，到退行期晚期又逐步恢复到先前休止期时 的水平。(4)拔毛后连续7天局部皮内注射血管生成素(总计7斗g)，到第10天时局部皮肤颜色为灰黑 色，与对照组相比无明显差异。但在皮肤反面，可以清楚地观察到注射血管生成素的小鼠皮肤血管的分 支明显增多，而且其不局限在注射部位。组织学上，注射血管生成素的小鼠皮肤厚度和生长期VI毛囊 胞增殖(Pd 量依赖性关系，随着血管生成素浓度的增加，s期细胞比率逐渐增加，当血管生成素为200ng／mL时S 期细胞比率最大。与对照组相比，血管生成素作用后细胞增殖指数(PI)明显增加，以100ng／mL血管生 血管生成素是一种新的毛囊起源的血管生成因子，在体内和体外血管生成素具有促进毛发生长和调节 毛囊周期性循环的作用。 多重PCR结合反向线点杂交方法检测七种常见性病病原体 王辉1周小勇1孔繁荣2 曾宪玉1。王玮蓁1段逸群1 琳．吉尔伯特2曾