急慢性HBV感染者与疫苗接种者体液与细胞免疫反应的研究.pdfVIP

B13．急慢性HBV感染者及疫苗接种者体液及 细胞免疫反应的研究 北京军区总医院肝病研究所(100700) 闻炜姚鹏胡大荣 乙型肝炎是一种危害极大的疾病，目前认为乙型肝炎病毒(HBV)对肝细胞的损伤主要是由于HBV 感染后所引起的免疫应答所致。HBV感染后，机体可激发一系列针对HBV抗原的体液免疫和细胞免疫 应答，为进一步了解HBV感染后体液及细胞免疫在疾病过程中的变化及HBV感染致病过程及HBV清除 中的作用，更好的了解HBV感染后肝细胞损伤的机制和HBV感染的慢性化评估，我们对急慢性HBV感 染的病人及疫苗接种者的体液及细胞免疫反应进行了较系统的研究。 1．材料和方法 1．1病例选择 HBV DNA+]；10例，HBV +(HBeAg+)，核心抗原+(HBoAg+)，HBV 月第五次全国传染病与寄生虫病学术会议修订的诊断标准。8例疫苗接种者，按0，1和6个月接种 HBs疫苗三次。以上两组均排除其他免疫系统疾病，未用免疫制剂，近期无感染。 20ug I．2外周血单个核细胞(PBMc)分离：常规PBMC分离。 1．3 x10s T细胞增殖反应检测：1 PHA 96孔板，一式三份，分别加入HBV抗原10uL／孔及1：300 彻底混匀后，静置15rain，测各孔3．570值，按以下公式计算增殖指数。 增殖指数=实验组测得OD值／x}照组测得OD值 1．4细胞因子检测 行。 1．5抗一HBS分泌B细胞(ASC)检测 牛血清预孵育lh，再以2．5 显微镜计数暗红色斑点，结果用每106个PBMC中抗体分泌细胞的均数表示。 1．6细胞因子对体液免疫反应的影响 1 1．7统计 t检验、12检验、SNK检验。 一13：一 2．结果 2．1急慢性HBV感染者对HBsAg的细胞与体液免疫反应 结果显示，急性患者抗一HBs分泌B细胞水平明显高于慢性患者，并且急性期T细胞反应亦明显高于慢 性患者(P0．01)，(见表1)。 表1急慢性HBV感染者HBV特异的细胞及体液免疫反应(x±SD) Tab·1 HBsAg—SpecificIramuneRespon$8inAcute 注：*急性与慢性患者相比及接种者与慢性者相比，P0．01； Acute B：Chronic B Hepafids He叫血B Vaccination：ChronicPO．01 P0．01；5ubjec忸with Hep撕68 #急性与慢性患者相比，P0．01； Acute B B：Chronic P0．01 Hepmids Hepatitis 增高，在第二周后逐渐下降，之后持续在一个较低水平。ALT也随着病程逐渐下降，在一个月左右降至 正常，二者无统计学相关性。 2．3急慢性患者T细胞反应水平的变化 动态观察急、慢性HBV感染者T细胞反应的变化，发现急性期患者早期显示对HBS的明显T细胞 增殖反应，以后，逐渐下降。慢性患者T细胞反应维持在一个较低水平。也有患者在发病数月后出现增 殖的T细胞反应。 HBs 2．4疫苗接种者细胞和体液免疫反应：8例健康疫苗接种者按照0，1，6个月接种三次20ug 疫苗，在首次接种和第二次接种后1周，分别出现HBS特异的T细胞增殖反应增高，这种反应呈一过 性，随后即消失。在首次接种2周后抗体分泌B细胞水平增高，以后逐渐下降，在12周后降至较低水 平，在第三