2014年高考生物一轮复习之38《微生物的利用》专题教案.docVIP

考纲浏览 微生物的利用（Ⅱ） 课前预习 一、培养基 二、无菌技术 1．消毒 (1)特点：使用较为的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体(不包括芽孢和)。 (2)常用方法：煮沸消毒法、、化学药剂消毒法。 2．灭菌 (1)特点：指使用强烈的理化因素杀死物体内外包括芽孢和孢子。 (2)常用方法：灭菌、干热灭菌、灭菌、紫外线消毒。 三、微生物培养的基本技术 1．配制培养基： 称量→混合→溶化→调pH→分装→包扎。 2．灭菌：加水→加培养基→密封→排冷气→维持压力→取出倒平板(或搁置斜面)。 四、菌种保藏 1．临时保藏 (1)操作： 采用培养基，菌落长成后，放入4冰箱中保藏，以后每3～6个月，转移一次新的培养基。 (2)缺点：保存时间，菌种易被或产生变异。 2．长期保存法：法，放在－20℃下保存。 五、土壤中分解尿素细菌的分离与计数 1．菌种筛选 (1)培养基：。 (2)特点：是唯一氮源。 2．统计菌落数目 (1)计算方法 ①。 ②。 (2)平板计数公式：显微镜上计数×M。 微生物的培养与应用微生物的实验室培养(1)培养基概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。分类和应用 培养基种类 特　点 用　途 物理[来源:学§科§网] 性质[来源:学科网ZXXK][来源:Zxxk.Com] 液体培养基[来源:Z.xx.k.Com] 不加凝固剂[来源:学|科|网Z|X|X|K] 工业生产 半固体培养基 加凝固剂，如琼脂 观察微生物的运动、分类、鉴定 固体培养基 微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种 化学 成分 天然培养基 含化学成分不明确的天然物质 工业生产 合成培养基 培养基成分明确(用化学成分已知的化学物质配成) 分类、鉴定 用途 选择培养基 培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长 培养、分离出特定微生物(如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度食盐) 鉴别培养基 根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品 鉴别不同种类的微生物，如可用伊红—美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽) ③培养基配方及营pH、特殊营养物质以及氧气的需求。 来源 功能 碳源 无机氮源 CO2、NaHCO3、CaCO3等含碳无机物 ①构成细胞中的物质和一些代谢产物；②既是碳源又是能源 有机碳源 糖类、脂质、蛋白质、有机酸、石油、花生粉饼等 氮源 无机氮源 无机氮：NH3、铵盐、硝酸盐、N2等 将无机氮合成含氮的代谢产物 有机碳源 牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸 合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物 生长因子 维生素、氨基酸、碱基 ①酶和核酸的组成成分；②参与代谢过程中的酶促反应 知识拓展：①微生物最常用的碳源是糖类，尤其是葡萄糖；最常利用的氮源是铵盐C、H、O、N的有机化合物既是碳源，又是氮源、能源。有些培养基不需要添加特殊营养物质，生物自己能合成，如大肠杆菌能合成某些维生素，作为特殊营养物质。制备：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。(2)微生物培养的无菌技术进行无菌操作主要是为了防止外来杂菌的入侵，重点是消毒和灭菌。消毒和灭菌的区别 使用方法 结 果 常用的方法 消毒 较为温和的物理或化学方法 仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子) 煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法等 灭菌 强烈的理化因素 杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子 灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌②三种常用灭菌方法的比较灭菌方法 适用材料或用具 灭菌条件 灭菌时间 灼烧灭菌 接种环、接种针或其他金属工具 酒 直至烧红干热灭菌 玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属用具等 干热灭菌箱内，160 ℃～170 ℃ 1 h～2 h高压蒸汽灭菌 培养基等 高压蒸汽灭菌锅内100 kPa，121 ℃ 15 min～30 min2、微生物的纯化培养及菌种的保藏(1)原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。(2)方法：平板划线法、稀释涂布平板法。方法 平板划线法 稀释涂布平板法 注意事项 (1)接种环的灼烧第一次划线前：杀死接种环上的微生物，避免污染培养物 每次划线前：杀死残留菌种，保证每次划线菌种来自上次划线末端 划线结束后：杀死残留菌种，避免污染环境和感染操作者 (2)灼烧接种环之后，要冷却后再进行操作，以免温度太高杀死菌种 (3)划线时最后一区域不要与第一区域相连 (4)划线用力要大小适当，防止用力过大将培养基划破(1)稀释操作时：每支试9 mL水、移液管等均需灭菌；操作时，试管口