中药启乐抗肿瘤转移作用探究.pdfVIP

中药启乐抗肿瘤转移作用研究 郫广蛹张丹张静聂克夏丽英刘铠 (山东中医药大学中西医结音肿瘤防治技术实验室济南250014) 通过对肿瘤转移过程中体内血液流变学特性的动态观察，发现了中药启乐具有抗肿 瘤转移的作用。现采用自发转移、血道转移和淋巴道转移多种模型进一步观察和探讨其 抗肿瘤转移作用及特点。 1实验材料 1．1动物 c57 BL／6小鼠18～229，615小鼠18～229，昆明种小鼠18～229。 以上动物由中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤医院肿瘤研究所提供，清洁级，许 可证编号：sc)Ⅸ11．00—0006。 H＆肝癌小鼠、B16．F10黑色素瘸小鼠、子宫颈癌U14腹水型小鼠、kMis肺癌小鼠、 以上均由中国医学科学院动物实验中心提供。 1．2药物 启乐提取液：89生药枷，由山东中医药大学天然药物实验室提供。丝裂霉素：2rIlg／ 瓶，日本协和发酵工业株式会社出品，批号：314AJc。 2方法与结果 2．1中药启乐抗自发转移 2．1．1启乐对bm肺癌自发肺转移模型的影响从荷瘤小鼠上剥离并选取生长良好 的瘤块，按瘤块(g)：生理盐水(nd)为1：3的比例匀浆，在c57BL／6小鼠腋窝皮下接种肿 瘤匀浆液0．2“／只。接种24h后．，J、鼠随机分5组，开始给药，一组生理盐水对照组(生 TIll／只，1次／d，共21d；丝裂霉素组(2r119注射 裂霉素组(4～6mg／只)灌胃给药容量为0．4 前用生理盐水稀释至5rnl，腹腔注射，剂量为0．05Tnl／只，用药5d)。第2l天颈椎脱臼处 死动物，称小鼠体重，瘤重和肺重，B0uin液固定，解剖镜下计数肺部正反面及肺叶间的转 移瘤灶，做病理组织切片观察，最后用Mann．whifneyU1bt的方法检验肺转移结节数的 组间差异。以上实验共重复三批，每批动物同一性别，结果见表1。 330 寰l中药启乐对挑肺癌自发转移摸型的影响(需±s) 注：与生理盐水对jIll组比*P0．05；*。PO．0l 由结果可知，三批实验中，中药启乐均可使肺转移结节数明显少于生理盐水对照组 (PO．01，P0．05)并且呈现出明显的量效关系，第一、二批实验启乐大、中剂量及第三 批实验启乐太、中、小剂量组肺转移率也均小于生理盐水对照组，因此证明中药启乐对 鼬肺癌自发转移具有非常显著的对抗作用。 病理切片证实，肺转移瘤灶为k耐8肺癌。 抽取U14泼 2．1．2中药启乐对小鼠子宫颈癌u14脾内移植后肝转移模型的影响 水瘤，台盼蓝排斥法计数活细胞数，用无血清的RPMI．1640培养液调整癌细胞浓度 为108制备用，用O．25％戊巴比妥钠0．4～0．6IrIl／只腹腔注射麻醉小鼠。在小鼠的左侧 腹部(脾区)消毒后，剪开约lam的小口，剥露脾脏并固定，用4M号针头在脾脏的一端 包膜下缓慢地注人0．0l“癌细胞悬液，将脾脏退回腹腔内，缝合切口。24h后随机分组， 分组及给药同上。第14天处死小鼠，切取肝、脾、肺、肾等器官及腹腔内部分淋巴结(包括 幽门、肾门处淋巴结)，＆心n液固定，HE染色，组织学观察来确定各器官及淋巴结是否有 u14癌的转移灶，肝转移程度的组织学分级标准：0级：无转移；1级；肝内有1～2个200 ～500坤1的小转移灶；2级：肝内有3～5个小转移灶或1～2个500～1000”m的较大转移 灶；3级；肝内存在广泛转移灶。以上试验重复三批，每批动物同一性别。结果见表2。 33l· 裹2中药启乐对小■子富颈癌u14脾内移檀肝内自发转移的影响(％，重±s) 往：与生理盐水对照组．*P0．05；**PO．01 由以上结果可知，兰批实验中，中药启乐均可使肝内转移结节数明显少于生理盐水对 照组(P0．05，PO．01)，并且第一批实验大中小剂量组和第二、三批实验大、中剂量组 使转移率也均小于生理盐水对照组，肝转移程度组织分级上，启乐组远较生理盐水对照组 和丝裂霉紊组轻。以上结果证明，中药启乐对小鼠子宫颈癌u14脾内