大蒜在葱科的分子分类地位研究.pdfVIP

第 29卷第 4期 徐 州 工 程 学 院 学 报 (自然 科 学 版 ) 2014年 12月 Vo1．29No．4 JournalofXuzhou InstituteofTechnology (NaturalSciencesEdition) Dec．2O14 大蒜在葱科的分子分类地位研究 侯进慧，李同祥，蔡文佳 (徐州工程学院，江苏 徐州 221018) 摘要：通过扩增获得 18SrRNA和叶绿体 16SrRNA基 因序列，测序并提交GenBank，登录号 分别是 JF719285和 JF719286．利用大蒜和 GenBank相关序列构建系统发育树 ，进行分子演化分 析．结果表明：大蒜 18SrRNA基 因与球序韭、韭菜、茗葱等葱科植物序列相似度高；叶绿体 16S rRNA基 因与龙舌兰科和薯蓣科的物种序列相似度高．大蒜与葱科植物在 18SrRNA序 列上具有 较高的同源性．18SrRNA序列在植物演化方面的区分度 比16SrRNA高． 关键词 ：大蒜；rRNA；分类；鉴定 中图分类号：Q946 文献标志码：A 文章编号：1674—358X(2014)04-0047—04 大蒜 (Alliumsativum)是天门冬 目(Asparagales)葱科 (Alliaceae)葱属(Allium)植物，又名胡蒜、葫，它 既可以做调味品也有药用价值．中医理论认为大蒜味辛、性温，入脾、胃、肺经，具有温中消食、行滞气、暖脾 胃、消积 、解毒、杀虫的功效 ，主治饮食积滞 、脘腹冷痛、水肿胀满 、泄泻 、痢疾 、疟疾、百 日咳、痈疽肿毒、白秃癣 疮 、蛇虫咬伤以及钩虫、蛲虫等病症，近年大量实验研究和临床验证证实 了大蒜具有抗血小板凝聚、降血压 、 改善血流纤溶活性和外周微循环 、显著降低血液黏稠度和改善红细胞浓集现象、抗实验性动脉粥样硬化 、扩 张血管和防治脑梗塞等作用 ，对中老年人的这一常见病和多发病有肯定和综合 的防治作用．大蒜的活性成分 有蒜氨酸(alliin)、蒜酶(allinase)、大蒜辣素 (allicin)和阿霍烯 (cis—ajoene，trans—ajoene)等．目前对大蒜的药 理作用 、生物活性和临床开发利用的研究较多[1]． 在植物性食品的鉴定中，一般是利用形态学、细胞学、生理学等方面的特征进行表型分析和资源的分类． 随着分子生物技术的发展 ，利用数据信息量较大的DNA分子信息，直接从 DNA分子水平进行物种鉴定 已 成为一种快速有效 的方法[6]．目前 ，rRNA基 因序列分析技术 已应用于食 品的检测和鉴定 中，扩增植物 rRNA基因并进行碱基序列测序分析 ，是进行分子鉴定 的很好标记．相关研究表明，rRNA基因用于食品质 量监控、鉴定是高效可行的方法_7。 ．李萍等[15]研究了忍冬科植物忍冬的5SrRNA基因间序列的变异 ，探讨 了金银花药材道地性的基因基础．有研究者根据模式植物拟南芥的 18SrRNA基因序列设计引物，对三七根 的 18SrRNA基因序列进行基 因克隆、测序 ，并与模式植物拟南芥以及人参属植物喜马拉雅人参 的相应序列 进行 比较．通过对产于广西靖西的三七根的 18SrRNA基 因进行克隆测序 ，获得 了三七根 的18SrRNA基因 的部分序列特征 ]．也有人分析了三七及其伪品竹节参蓬莪术 、温莪术 、桂莪术的 18SrRNA基因序列 ，确定 蓬莪术、温莪术和桂莪术 18SrRNA基因序列之间只有 1个变异位点，而与三七之间有 94个 ]． 本文对大蒜核糖体 18SrRNA和叶绿体 16SrRNA基 因序列进行扩增和序列分析，与 GenBank数据库 中相近序列进行了比对 ，分析了大蒜的分类问题，为相关食品分类和鉴定提供了方法参考． 1 材料 与方法 1．1 材料和试剂 大蒜样 品采 自于徐州市铜山区菜地 ，采摘后立即带到实验室进行研究分析．实验所用的生化试剂使用 “国药集团化学试剂有限公司”产品，基因组提取 、DNA胶 回收等试剂盒和分子生物学试剂购 自 “天根生化 收稿 日期 ：2014～02—28 基金项 目：江苏省高校 自然科学研究项 目(12KJD550003)；江苏省博士后基金项 目(1302041B)；徐州工程学院校级科研课题 (2013)；徐州工程 学院大学