2-羟基-1-萘甲醛缩氨基硫脲铁(Fe-HNT)配合物模拟辣根过氧化物酶的研究和应用.pdfVIP

第十届全田有机分折学术研讨会 过氧化物酶的研究及应用 唐波杜鸣刘阳 (山东师范大学化学系，济南250014) 分光光 关链词2一羟基-l-萘甲醛缩氨基硫脲铁(Fe—HNT)配合物模拟辣根过氧化物酶 度溺涌定碗麓糖 嗡姜弋本文研究了Fe一赋T配合物作为过氧化物模拟酶对过氧化氢氧化抗坏血酸反应的催化性 t 问存在线性关系，检测跟为0．24pg／mL。测定正常奎和糖尿病患褪中葡萄糖臼q垒量，结果满意。 金属卧啉常被广泛用作过氧化物酶的模型…。我们研究发现，尽管结构不同，Fe和liNT 的配合物却与金属卟啉或HRP有相似的催化性能。利用该特性，我们通过偶联反应测定葡萄 糖的含量，本法灵敏度高，反应稳定。 1试剂与仪器 mol／L 实验用水为二次蒸馏水。HRP(上海丽珠东风生物技术有限公司)配成I。0×10。6 1 mol／L；H她溶液0．3％；Tri 4．0×10。mol／L 海雷磁仪器厂)。 ’ 2实验方法 Fe孙，HNT溶液和 于lOmL比色管中，加入2．5mLpH7．0的Tris-HCl缓冲溶液，0．ImL 0．8mL 处起始吸光度A；，加入5gl 分钟，作动力学计算。10分钟后记录终止吸光度A，，定义△皓=A；一A，。 3葡萄糖的测定 GOD，一定量 在lOmL比色管中，加入2．5mLTris-HCl缓冲溶液(pH7．0)，0．2mL94U／mL 葡萄糖标准溶液。5分钟后，溶液被立即冷却到0℃以终止氧化反应，然后加入0．ImLFe孙， 分钟后，记录终止吸光度A，，计算吸光度差△如酷。 4反应条件优化 实验确定反应最适条件是酸度为pH XlO‘6mol／L， min。 ASA浓度为4．0×10一Smol／L，反映时间为i0 5配合物的配位比 用摩尔比法和连续变化法测定配合物的配位比为l：i(Fe：HNT)。 D109 第{4届全国有机分析学术研讨会 6 Fe-HNT、金属卧-啉和HRP催化活性比较 结果见表1 襄1 Fe．洲T，佥一卧啉和H胂催化性能的比较 I IIII-_- --■-__●-_●_●_-__-_--●■■-●___■-■__-●_●_-●●-_-_-●■-_-_-_■●_●_●●__●___一 酶 (c]q(∞L，，L) V帆x(s。) Kcat(10。1．／mol／s)相对催化活性(％) f：E—HNT 4．0×10。 9．32