不同溶剂中酶催化合成油酸酯探究初探.pdfVIP

不同溶剂中酶催化合成油酸酯研究初探+ 李国平曾健青++张耀谋刘莉政张镜澄 (中国科学院广州化学所广州 510650) 摘要：本文对几种非水溶剂中脂肪酶催化合成油酸酯(油酸乙酯，油酸正辛酯和油酸油酯)进 行了初步考察．结果表明，在环己烷、正庚烷和甲苯等有机溶剂中上述酯化反应都有很高的转 化率：在所考察的实验条件下超临界C02中反应的转化率略比上述有机溶剂中的低，但该结果 已初步显示以超临界CO：替代有机溶剂合成油酸酯具有很大的应用潜力． 关键词：超临界C02，有机溶剂，酶催化，油酸酯 酯蜡是一类高级脂肪酸醇酯，被广泛用于化工、纺织、医药、日化和食品等工 业中…。生物体中多数酯蜡含量小，难以收集。传统的酸碱催化化学合成酯蜡，通 常需要在高温、高压及强酸、碱条件下进行，副反应多，产物分离困难，生产成本 高，且随着脂肪酸和醇碳链的加长，反应难度加大12】。用酶催化合成酯蜡能弥补化 学合成的不足，因此它是酯蜡合成最佳途径之一。 脂肪酶是一种高效生物催化剂，它的活性高，底物适应性宽，能广泛地用于催 化酯化与酯交换反应中”1。但是，酶在水性介质中通常十分娇嫩，不稳定，在热、 酸、碱等条件下容易变性失活。另一方面，脂肪酶大多易溶于水，在含水介质中容 易流失，不能回收利用，并且大量水的存在会大大降低酯化反应的转化率。因此， 寻找合适的非水介质是酶催化合成工作者最感兴趣的课题之一。所幸的是，近年来 许多研究表明，在非极性或弱极性的有机溶剂中许多酶能保持较高的活性，并且热 稳定性比水性介质中要高得多．然而，以有机溶剂为介质仍然存在产物分离困难和 不可避免地对环境造成污染等系列问题。为此，寻找更合适的反应介质是极具挑战 性的课题。 超临界C02是介于气态与液态之间的一种特殊状态的流体，它兼有气体和液体 的优点，在溶解性能上与有机溶剂相似，在传质和分离方面还优于有机溶剂”l，并 且不会对环境产生污染，合成产品也更利于人体健康。近年来，人们基于超临界二 氧化碳的上述优点和在极性上与环己烷等非极性溶剂相近的特点，开展了超临界二 +中科院九五基础性研究重点项目、广东省自然科学基金和广州市重点项目资助． “通讯联系人． 氧化碳介质中的酶催化反应的研究，并取得了令人鼓舞的进展。本文以油酸酯的合 成为研究对象，初步考察并比较了几种有机溶剂和超临界CO：中合成反应的结果， 为用超临界C02替代有机溶剂介质合成酯蜡的可行性提供参考． 1实验部分 l I材料和反应装置 脂肪酶：工业品，外购；油酸、乙醇和正辛醇：化学纯，广州新港化工厂产： 油醇：化学纯，进口分装；甲苯、环己烷和正庚烷：分析纯，广州新港化工厂产： 二氧化碳：食品级，广州氮肥厂产．WDP型微生物多用培养箱：山东大学生产． 超临界反应装置：自制． 1 2分析方法及条件 产物由GC—MS及GC进行定性定量分析，定性主要参照质谱谱库的检索结果及 查对质谱手册而确定．分析条件为：GC—MS：QP一5000型色质计算机联用仪，离 子源为电子轰击源，电离电压70电子伏特，质量范围20～560。色谱柱为DB．1 石英毛细管，柱长28m，内径0 GC：岛津GC一9A气相色谱仪，与计算机联用，固定液为OV一1的玻璃填充柱，柱 长2m，内径3mm，柱温280℃，检测器温度285℃，氢火焰离子化检测器，载气 为高纯氮． 13酯化反应 1 3．1 有机溶剂中的反应：称取等摩尔的油酸和醇溶解在有机溶剂中，配成 0 然后将锥形瓶放入摇床．在45℃条件下反应一定时间后，停止反应，用吸管取出 上层清液，取样分析． 1．32超临界C02中的反应：反应装置简图如图1所示。称量等摩尔的油酸和醇， 加人0．1L的高压釜中，加入反应底物总重的9％的酶，升温升压至预定值，反应一 定时间后，终止反应，低温下排气取样分析． 1一钢瓶，2一阀门，3—净化器，4一高压泵，5一冷凝器，6一反应釜，7-水浴恒温槽 图1超l临界釜式反应装置 2结果与讨论 三个反应体系分别在三种不同有机溶剂中的反应结果列于表1中。由表可见， 在甲苯、正庚烷和环己烷三中有机溶剂中，随着醇分子碳链的增长，反应的转化率 都随之下降。对于同一反应，则在极性较小的正庚烷和环己烷中的转化率较高，在 甲苯中的转化率则比前二者小得多． 表1有机溶剂中的反应结果 反应温度：45℃ 三个反应体系在超临界C02中的反应结果列于表2中。由表可知，随着醇分子 碳链的增长，在超临界二