DIGSA联合检测PRV、Brucella、Chlamydia、PPV抗体探究.pdfVIP

矗i恳☆鼎蔫景巍蠹纛 255 f S ￡S 2，6 DIGSA联合检 S∥’≥，2旨 李继祥’ 曹三杰文G田 上述四病是引起种猪发生繁殖障碍的主要疫病，控制这 猪伪狂犬病(Pseudorabies．PR)是由疱疹病毒科中的猪 suis 些疫病的发生，实施综合防制措施非常必要的，但现有检测 疱疹病毒I型(Herperoirus1；原名猪伪狂犬病病毒， Pseudorabits 方法都存在某些不足，而且不能进行联合诊断．本研究为寻 viru8，PRV)引起猪的急性传染病．属于典型的 自然疫源性疾病．近年来具有流行的趋势。其主要引起妊娠 求一种简便实用且可用于联合诊检上述四病的血清学方法 母猎发生漉产、死产、产弱仔等．新生仔猪及断奶仔猪发生严 丽以胶体金标记技术为基础建立了斑点免疫金染色试验 (DotImmune Gold 重死亡，公猪搴丸肿胀或萎缩，一般成年猪呈轻微的呼吸困 StalnlngAssay，DIGSA)。 难和生长延缓．现有的病例表现为瘙痒或仅表现为发热、麒 制备敏感、特异、稳定的胶体金探针是建立DIGSA的基 揭等．实施扑灭计剜已成为世界上有效控制猪伪狂犬病的主 础。本研究利用柠檬酸三钠一鞣醴还原法制备直径为15nm 要措施。为了有效的完成扑灭计划，除应严格进行有效的免 左右的胶体叠，在pH值9．0下标记经硫酸铵和DEAE一32 疫接种外，建立快速、准确，简便．特异的诊捡方法非常重要。 提纯的兔抗绪kG，以BSA作稳定剂，以离心法纯化制成肢 对猪伪狂大病的诊断，除病原学方法外．还有多种血清学方 体金探针。该探针对猪IgG的最低检出量为2．547×10一g， 法，其中最常用的是中和试验、乳胶凝集试验和酶联免疫吸 与兔、鸡、牛的IgG不发生作用，在4℃至少保存10个月及室 附试验． 温保存1个月，敏感性及特异性不变。 布氏杆菌府(Brucellosis)是由布氏杆菌(Brucella)引起 多种动物和人的传染病的总称。在家畜中以牛、羊、猪最常发 探针作染色指示抗原抗体的特异性反应。操怍：经提纯的 生，患病母畜常发生流产，患病公畜表现为睾丸炎、附皋盎。 PRV抗原，PPv抗原、衣原体属特异性抗原、布氏杆菌补反 病原分离是诊断布病最可靠的方法，但需时问长．检出率低． 抗原lyl正面点样于NCP上，包被后，以BSA封闭、干后即 布病血清学检测方法较多，但在敏感性、特异性和操作程序 为抗原膜片。检样时，待检猪血清与抗原膜片作用后，再用胶 等方面各有优劣．试管凝集试验(SAT)是我国目前检测布病体金探针染色。阳性样品即可在点样处出现红色斑点，阴性 的主要血清学方法．也是国际上检疰布病的重要方法，并在 样品则不见颜色反应。抗原膜片的保存期在--20℃及4℃至 此基础上建立了傲量凝集试验(MAT)，但对猪布病的诊断少为10个月、在室温为1个月。本研究发现，抗原的质量直 结果不一定很可靠．对猪的布病一般主张甩DTH结台CFT接影响D1GSA的敏感性和特异性，且只有使用合适的待检 进行谚断。 血清、胶体金探针的稀释液和洗涤i葭，用性斑点与背景的反 表原体病(Chlamydiosis)也是一种人兽共患传染病．鹦差才强烈。 鹉热衣原体(Ch缸螂diapsittaci)可引起猪发生流产、宰丸经交叉反应和阻断试验证明DIGSA具有良好的特异 炎、拯尿生殖道感染、角膜结膜炎、肠炎、肺炎、多关节炎、多 性。PRV抗原膜片只与猪伪狂犬病阳性血渍反应，且可被兔 浆旗炎等