前红松和红松的系统比较研究.pdfVIP

第47卷第 1期 东 北 师 大 学 报 ( 自 然 科 学 版 ) Vo1．47No．1 2015年 3月 JournalofNortheastNormalUniversity(NaturalScienceEdition) March2015 [文章编号21000—1832(2015)01—0119—05 [DOI]10．16163／j．cnki．22—1123／n．2015．01．022 前红松和红松的系统 比较研究 由继红，陆静梅 ，费虹天 (东北师范大学生命科学学院，吉林 长春 130024) [摘 要] 从结构植物学、植物生物化学、分子生物学三个方面对红松和前红松进行了系统的 比较研 究．结果表 明：前红松叶的角质层 内表面的胞间凸缘为浅波浪状，缘厚 ；红松叶的角质层 内表面的胞 间凸缘为深波浪状，缘窄．过氧化物同工酶 电泳结果可见，前红松有8条酶带，红松 有 7条酶带；前红松的酯酶 同工酶电泳有 6条酶带，红松的酯酶同工酶 电泳有 5条酶带．前红 松与红松叶绿体基因组中的rbcL基因片段458个核苷酸中有 5个不同． [关键词] 前红松；红松；角质层；过氧化物 同工酶；酯酶 同工酶；叶绿体基因rbcL [中图分类号] Q944．53 [学科代码] 180·5130 [文献标志码] A 红松(PinuskoraiensisSieb．etZucc．)是松属中一个古老的树种，天然分布 中心在中国的小兴安岭 和长 白山林 区，俄罗斯东南部、朝 鲜北部和 日本本州 中部 山地也有部分分布Ⅲ．前红松 (Pinus prokoraiensisY．T．Zhao，J．M．Lu，etA．G．Gu．)是松属中一个新种 ，也是一个珍稀树种 ，现仅存于 中国吉林铁路局的土门岭林场 ，它具有生长快、抗盐碱性强等优点[2。]． 前红松与红松形态相似 ，极易混淆 ，为了澄清其区别 ，陆静梅等研究了前红松和红松茎 、叶解剖结构 上的差别[4]．但有关前红松和红松叶的角质层 、生理生化及分子生物学，特别是基因的核苷酸序列方面 的研究未见报道．本文从这几方面对二者进行 了系统的比较研究，以为前红松与红松的区别提供新的 依据． 1 材料和方法 1．1 实验材料 红松取 自吉林省辉南县三角龙湾 ，地理位置为东经 126。24、北纬42。26，海拔 833m；前红松取 自吉 林省土门岭林场 ，地理位置为东经 126。02、北纬 44。O6，海拔 260m． 1．2 实验方法 1．2．1 叶角质层 内表面的观察 取胸径为 20am 的前红松与红松 的成熟叶片制备角质层样品[引．角质层经不同浓度的乙醇脱水、干 燥后 ，内表面向上粘在样品台上 ；IB-3离子溅射仪镀 20nm厚的金膜．用 日本产 S-57o型扫描 电子显微 镜观察并照相，电压 20kV． 1．2．2 同工酶 电泳 采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板 电泳法．各选 5株植株，1O年树龄，选取位置 、叶龄相 同的幼叶，用 o．05mmol／LpH=7．5的磷酸缓冲液冰浴研磨，于 4℃条件下，11000r／min离心20min，取上清液用 于实验．过氧化物酶同工酶电泳的浓缩胶浓度为 3．5％，分离胶浓度为 6．5 ，用联苯胺法染色嘲；酯酶 同工酶电泳所用浓缩胶浓度为3．6 ，分离胶浓度为 7．5 ，参照文献[10]的方法进行染色．用过硫酸铵 [收稿 日期] 2014—05—07 [基金项 目] 国家 自然科学基金资助项 目；吉林省科技发展计划项 目 [作者筒介] 由继红 (1965一)，男 ，博士，高级工程师，主要从事结构植物学研究． 第 1期 由继红 ，等 ：前红松 和红松 的系统 比较研 究 121 前红松与红松的酯酶同工酶电泳结果见图3．由图 3可见 ，前红松有 6条酶带 ，红松有 5条酶带．I 区：前红松和红松各有 1条酶带；II区：前红松有 4条酶带，红松有 3条酶带；Ⅲ区：前红松和红松各有 1 条酶带． 2．3 分子生物学实验结果 随机取 5株红松和前红松个体 ，分别测定其 rbcL基因片段 的核苷酸序列 ，结果见 图4．