拟南芥AtRAC在盐胁迫应答中的功能研究.pdfVIP

2O15年 3月 四川大学学报(自然科学版) M ar．2O15 第52卷 第 2期 JournalofSichuanUniversity(NaturalScienceEdition) Vo1．52 No．2 doi：103969／j．issn．0490—6756．2015．02．035 拟南芥 ARAC在盐胁迫应答 中的功能研究 翟先芝，杨虹伟，杨皓，刘志斌，王健美，杨毅，李旭锋 (四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室，成都 610064) 摘 要 ：本 实验所研究的拟南芥AtRAC含有两个RING结构域和三个蛋 白激酶 C保 守区域 1结构域即C1结构域．通过体外泛素化证明了AtRAC具有E3连接酶活性，亚细胞定位 实验 结果表明AtRAc定位在细胞核 中．组织特异性分析表 明AtRAC在根 中的表达量很高，但是 在 茎、叶和花中的表达量较低，而且 AtRAC的表达受到 NaCl胁迫的诱导．进一步对 atrac突 变体的分析表 明，在 NaCI处理下，突变体atrac的萌发率降低 ，侧根数 目也降低．初步研究表 明拟南芥AtRAC可能是一个与盐胁迫应答相关的基 因． 关键词 ：E3连接酶 ；亚细胞定位 ；表达谱分析 ；组织特异性 ；盐胁迫 中图分类号：Q945 文献标识码 ：A 文章编号 ：0490—6756(2015)02—0416—07 Functi0nalanalysisofarabidopsisAtRAC inresponsetosaltstress ZHA IXian—Zhi，YANG Hong—Wei，YANG HAO ，LIUZhi-Bin， WANGJian—Mei。YANG Yi．L Xu—Feng (KeyLaboratoryofBio—resourcesandEco—environment，M inistryofEducation，Collegeof LifeSciences，SichuanUniversity，Chengdu610064，China) Abstract：ArabidopsisAtRAC containstwoRING structuredomainsandthreeproteinkinaseC conser— vativearea1structuresnamelyC1structuredomain．Invitroself_ubiquitinationassaydemonstratedthat thisRING domain protein possessedan E3 ligaseactivity．Inthispaper，subcellularlocalization，gene expression profilesandtissuespecificityofitwerecarriedout．TheresultshowedthatAtRACwaslocal— izedtonucleus．TheanalysisofexpressionalpatternrevealedthatAtRACwashighlyexpressedinroot， Iessexpressedinleaves，flowerand stems．NaC1stresson seed germination andlateralrootformation Werealsoanalyzed．AndtheresultrevealedthatknockoutofAtRAC inArabidopsisshowedlow germi— nationrateandlesslateralroot．ThesestudiesdemonstratedthatAtRACwasrelatedtosaltstress．Thus indicatingthattheRING FingerProteinAtRAC mayplayan important】physiologicalroleinsaltstress process· Keywords：E3ubiquit