HaCaT细胞和SCL-1细胞蛋白质组差异分析.pdfVIP

越米越多的学者观察到血管内皮生长因子(VEGF)在CHS当中的作用。它是一种血管内皮细胞 产生和血管形成的主要调：1，物，能够刺激LC从皮肤向局部淋巴结迁移。VEGF有两大功能：促进血 管内皮细胞的分裂增生和增加血管通透性。两种功能是分别通过不同的受体来实现的，即Flt-1和 体结合后则可以增加毛细血管后静脉和小静脉的通透性，促进营养物质和炎性物质的渗出，其作用 中炎症细胞的浸润和IFN—Y的表达。 近年来关于雷公藤内酯醇对VEGF的抑制作用也逐渐为学者所关注。刘芳等采用免疫细胞化学、 等方法检测雷公藤内酯醇对经TPA诱导的培养人脐带内皮细胞的VEGF的影响，发现雷公藤内酯醇能 抑制经TPA诱导的内皮细胞上VEGFmRNA的表达、蛋白合成和分泌，并呈剂量依赖性。认为雷公藤内 酯醇是一种有效的VEGF的表达和生成的抑制剂。 昆明山海棠是一种与雷公藤同属不同种的药用植物，它的主要成分中即含有雷公藤内酯醇及其 它类似的有效成分。昆明山海棠能降低炎症过程中毛细血管的通透性，减少炎性渗出物和水肿。邓 文龙等于1981年报道，采川小白鼠因蛋清、二甲苯、组织胺或醋酸所致皮肤或腹腔毛细血管通透性 亢进的实验证明昆明山海棠的水煎液具有良好的抗炎作用，能抑制炎症时的毛细血管通透性增高， 减少渗出制增生。本实验中采川致敏前给药的方法，儿组药物均能明显抑制炎症反应，这提示药物 可能在致敏阶段通过阻断抗原的呈递而抑制PACD的发生。王晓彦在建立豚鼠光变态反应动物模承时 观察到，激发后48h平均红斑反应程度最大，并于72—96h不变，可以认为在48小时炎症反应最重， 体内各种炎性因子水平达到高峰。实验即选择激发后的48小时取豚鼠血清。实验结果显示，与模型 组比较，复方昆明山海棠颗粒剂组及阳性约物组(氢化可的松和羟基氯喹)能明显改善豚鼠背部皮 肤红斑、水肿等炎症反应，其皮肤红斑反应指数、真皮局部浸润的单一核细胞程度均小于模型组(P 照既往的研究，我们认为复方昆明山海棠颗粒剂抗PACD的作用机理是抑制VEGF的分泌。从而抑制 LC从皮肤向局部淋巴结迁移，通过阻断抗原的呈递而抑制PACD的发生；同时也抑制了IFN—Y的表 达，抑制炎性因子的产生，减少局部炎症细胞的浸润而起到抗炎、免疫调节的作用。 HaCaT细胞与SCL-1细胞蛋白质组差异分析 中国医科大学附属第一医院皮肤科朱红何春涤陈洪铎 北京大学深圳医院核医学科周海涛孙开来 中国医科大学医学遗传学教研室 富伟能 目前用于蛋白质组学研究的核心技术主要是双向电泳和质谱分析技术。应用蛋白质组学技术不 但可以高通量发现不同细胞间蛋白质的变化，寻找肿瘤相关蛋白，进而分析肿瘤发生、发展的可能耄『 制，而且可以通过特异性的差异蛋白作为疾病诊断治疗的分子标记。对病理组织细胞与正常组织细 ·95· 胞筹异蛋白质表达的研究。是比较蛋白质组学的重要内容。皮肤鳞状细胞癌起源于表皮和皮肤附属 器的角质形成细胞，是恶性度较高的皮肤非黑素瘤之一，其发生发展的机制还不十分消楚。HaCaT细 胞是源于人类表皮的角质形成细胞系，SCL-1细胞是源于人皮肤鳞状细胞癌的角质形成细胞，闪而它 们分别是研究人类表皮角质形成细胞和皮肤鳞状细胞癌生物学的理想模型。本研究利Hj蛋白质组学 蛋白，为筛选皮肤鳞癌相关蛋白提供依据。 1材料与方法 1．1 细胞来源HaCaT、SCL一1细胞由德国自由大学本杰明．富兰克林医学中心惠赠。 4—7、碘乙 1．2主要试剂与仪器IPG胶条(p114-7L，pH5-8L)、TBP、TEMED、两性电解质pII 酰胺、低熔点琼脂糖购自美国Bio-Rad公司，CHAPS、DTT、丙烯酰胺、甲叉双丙稀酰胺、过硫酸胺 购自中国科学院上海生物化学研究所，其余均为国产分析纯试剂。PROTEANIEF等电聚焦仪、PROTEAN Master2D plusDodecaI。垂直电泳系统为美国Bio-Rad公司产品，Image4．10凝胶分析软件为瑞典安 玛西亚公司产晶，凝胶扫描仪为台湾UMAX公司产品，4700串联飞行时间质谱仪为美国ABI公司产品。