微囊藻毒素-LR的全内反射荧光免疫传感器研究.pdfVIP

环境污染与防治 第 36卷 第9期 2014年 9月 微囊藻毒素一LR的全内反射荧光免疫传感器研究* 宋保栋 。 盛建武 廖志民 蔡 强 杨海洋 万金保。 (1．浙江清华长三角研究院，浙江 嘉兴 314006；2．江西金达莱环保股份有限公司，江西 南 昌330100； 3．南 昌大学环境与化学工程学 院，江西 南 昌 330031) 摘要 在开发全 内反射荧光免疫传感器的基础上，研究水中微囊藻毒紊一LR(MC—LR)的检测方法。建立 了基于 MC-IR平面 波导免疫芯片的制备方法，并结合流动分析和荧光检测开发检测系统，针对 MC-LR的免疫检测条件进行优化。结果表 明，全 内反 射荧光免疫传感器对 MC—LR抗体的检测限为 0．001 g／mL；在间接竞争免疫检测模式下，最优检测条件是预反应时间5min、预反 应温度 37℃、进样停 留时间 500s；在最优检测条件下 ，对MC—LR的检测限为0．100“g／L，线性区间为0．200--4．000／~g／L；全内反 射荧光免疫传感器检测 MC—LR的加标 回收率均在 100．0 ±20．0 ，平行测定的相对标准偏差小于 5 。 关键词 免疫传感器 全 内反射荧光 微囊藻毒素-LR 环境监测 Designoftotalinternalreflectionfluorescenceimmanosensorformicroystin-LR detection SONGBaodong ，SHENG Jianwu，LIAOZhimin ，CAIQiang ，YANG Haiyang ，WAN Jinbao ．(1．ZhejiangYangtzeDeltaRegionInstitute ofTsinghuaUniversity，JiaxingZhejiang 314006；2．JiangxiJindalaiEnvironmentalProtectionCo．，Ltd．，Nan— changJiangxi330100；3．CollegeofEnvironmentalandChemicalEngineering，NanchangUniversity，Nanchang Jiangxi330031) Abstract： Basedonplanaropticalwaveguide，atotalinternalreflectionfluorescenceimmunosensorwasdevel— opedtOdetectMicrocystin-LR inaquaticenvironment．AfterfabricationofMC—LR immuno—chip。flow analysisandflu— orescencedetectionwereintegratedtothedetectionsystem forimmuno—chip．ThendetectionmethodforMC—LR was developedandthedetectingconditionswereoptimized．Resultsshowedthatthedetection limitoftheimmunosensor foranti—MC-LRantibodywas0．001~g／mL．Byanindirectcompetitivedetectionmode，theoptimaldetectioncondi— tionswereachievedaspre—incubationtimeof5min，pre-incubationtemperatureof37℃ ，andthereactiontimeof500 S．ThequantificationofMC-LR rangeswasfrom 0．200to4．000t~g／L，withadetectionlimitdeterminedas0．100 ug／L．Matrixinterferenceoftheenvironmentalsamplewasassessedbyspikedsamples，andtherecoveryofMC—LR rangedfrom 100．0 士20．0 withrelativestandarddeviation values 5 ，which couldreachtherequir