大豆总皂抗衰老作用研究.pdfVIP

大豆总皂甙抗衰老作用的研究 工．生命实验的研究 高学敏1 靳莉1 汪锦邦1徐燕妒 叶恩赐3 北京市营养源研究所1 北京宣武医院2上海铁道医学院3 i大豆(SD山an)是人类主要的蛋白质及油类的来源，大豆加工产品中有多种生物活性物质。大豆皂甙(S。y- map0血n)的含量一般占豆粕干重的0．1—0．5％，在古代医学中已有用大豆制品做医药的记载。近年来，我们研 究组从大豆粕中通过分离提取技术得到了含皂甙70％的大豆皂甙粗制品，并对其抗衰老，提高免疫力，降血脂 等方面保健功能进行了研究。这些试验结果启示我们大豆皂甙可以开发作为防止心血管疾病及抗衰老的药 物。本文对大豆皂甙有关抗衰老方面的研究结果做一报导。J 1材料 1．1暴■生存实验 动物：o卅je∞．k．野生果蝇(Drosophila 不同浓度的大豆皂甙于培养饲料中。 1．2人胚肺二倍体威纤糊矗(HEuⅫ)抗衰老实验 人胚肺二倍体成纤维细胞(HELDF)：卫生部生物制品研究所提供．各项指标符合要求。 细胞培养液(DMEM 细臆培养：常规方法。 2方法及结果 2．1暴■生存实t方法爰结果 2．1．1方法收集八小时内新羽化的果蝇成虫，乙醚麻醉下区分雌雄。对照组给予普遍玉米培养基，实验组 ±2C。相对湿度65—85％。每周更新新鲜培养基两次．每2天观察记录果蝇生存数量，直到全部果蝇死亡为 止。计算出半数存活天数．平均存活天数和平均最长存活天数等三项指标。 2．1．2结果由表1材料证明大豆皂甙浓度添加量在0．叭～O．02％之间的培养基与对照组相比在果蝇生长 情况中。无论雌雄果蝇平均存活天数，平均最长存活天数都有延长寿命作用。二者差异较明显，有显著意义。 如大豆皂甙组果蝇比对照组平均寿命长4--7天。平均最长存活天数雄果蝇比对照组长7天左右，雌果蝇比对 照组长6天左右。 裹1大豆皂甙对暴■生存试验统计裹 A：由寿膏量长的10只果蝇计算再出 ·：试龃与对患组比差异曼著t义(Po．05) 2．2人旺辟成纤肇二倍体细胞的寿龠试验方法及结果 溶液。 ·302· 2．2．2实验方法 绑胞处于指数生长期时。S期和G2+M期细胞总数中的百分比。 2．2．2．2SOD测定方法免疫酶联法。试剂盒由军事医学科学院提供．实验过程基本参照说明书。 2．2．2．3染色体检查方法：按常规染色体制片核型分析。 2．2．2．4细胞一代存活时间的测定方法：一定代龄的细胞成片后，不传代，不换液，仅当培养液变酸时，用5． 6％碳酸氧铺调至PH=7．2，定期观察细胞生长情况，直至细胞生命全部脱落为止。 2．2．3实验结果 到舯代，而对照组细胞仅存活51代。这样皂甙组细胞的寿命比对照组实际延长了50％；相同代龄细胞也可看 到供应皂甙组的HELDF细胞长的形态要好。40代以后这种差异逐渐明显。 在细胞成片后不传代，不抉液，随着细胞的不断生长分裂使培养体系中各种养分逐渐缺乏，造成不利细胞 生长的不良环境。细胞能在这种条件下存括的时间可反应细臆对不良环境的抵抗能力。图1中可看出同样处 在这种不良的环境下，有皂甙组细胞比对照组细胞抵抗不良环境能力要强。(见图1)。 甜 如 M n o 4 O 39C39B46C 74B 46B51C 其中c为对照蛆，B为鲭药组 圈1给琦蛆和对照魍不同代■HELDF存活时间比较 由此可以看出大豆皂甙有延长HELDF细胞寿命，并延长细胞一代存活时间的作用。 2．2．3．2大豆皂甙对HELDF细胞衰老过程中，细胞增殖能力变化的影响： 在细胞传代培养过程中，每隔5代左右分别用漉式细胞计数测定两组细胞的增殖能力．由于两组测定的代 龄不完全相同．我们把5代作为～个实验阶段。 实验结果表