阿伐他汀通过磷脂酰肌醇3-激酶丝氨酸苏氨酸蛋白激酶哺乳动物雷帕霉素靶蛋白途径调节HL-60白血病细胞凋亡的作用.pdfVIP

JApplClinPediatr,February2015,Vo1．30,No．3 198 · 中华实用儿科临床杂志2015年2月第30卷第3期 Chin— — · · 血液 ／肿瘤疾病 · 阿伐他汀通过磷脂酰肌醇3一激酶／丝氨酸苏氨酸 蛋 白激酶／哺乳动物雷帕霉素靶蛋 白途径调节 HL一60白血病细胞凋亡的作用 刘苗 石清照 姜毅 【摘要】 目的 观察阿伐他汀对白血病细胞 HL--60增殖和凋亡的影响，探讨磷脂酰肌醇3激·酶／丝氨酸 苏氨酸蛋白激酶／哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K／AKT／mT0R)信号途径在此过程中的作用。方法 取对数生 长期细胞 ，分为阴性对照组和实验组 (阿伐他汀干预水平分别为1、5、lOtxmol／L)，培养 12、24、48h，采用四甲基 偶氮唑盐 (MTF)法检测白血病细胞的增殖能力 ；培养48h后，流式细胞术检测白血病细胞凋亡变化 ，反转录一聚 合酶链反应 (RT—PCR)和Westernblot方法检测朋 、AKT和 m加 基因表达的变化。结果 阿伐他汀对 白血 病细胞 HL-60有明显抑制增殖和促凋亡作用。10~mol／L阿伐他汀对HL-60细胞干预48h后对细胞增殖的抑 制作用最强，抑制率达到(39．77±3．01)％，与阴性对照组相比，差异有统计学意义 (t=4．016，P0．O1)，I司时 对细胞凋亡的诱导作用最强，凋亡率达到(43．29±3．91)％，与阴性对照组相比，差异有统计学意义 (t=3．625， P0．05)。此外，PI3K、AKT和 mTOR在 白血病细胞 HL-60均有基础表达，10i~mol／L阿伐他汀对HL-60细胞 干预48h后 ，PI3K、AKT和mTOR基因mRNA表达水平下调最为明显，分别下降了(37．05±4．11)％、(53．79± 3．27)％、(40．63±2．42)％，与阴性对照组比较差异均有统计学意义 (t=4．805、3．799、4．312，P均 0．05)，同 时对 PI3K、AKT和 mTOR蛋 白表达水平下调最为明显，分别下降了(41．09±3．17)％、(45．674-2．92)％和 (63．41-43．59)％，与阴性对照组比较差异均有统计学意义 (t：3．576、4．727、4．902，P均0．05)。结论 阿伐 他汀可能通过PI3K／AK．r／mT0R信号通路抑制白血病细胞增殖并诱导细胞凋亡。 【关键词】 阿伐他汀；白血病 ；细胞凋亡；磷脂酰肌醇3一激酶／丝氨酸苏氨酸蛋白激酶／哺乳动物雷帕霉素 靶蛋白通路 EffectofAtorvastatinonapoptosisofHL一60leukemiccellsviatheregulationofthephosphatidylinositol3一 kinase／serine／threonineprotein kinase／mammalian targetofrapamycin signalingpathway MMiao． Qingzhao，JiangYi．DepartmentofPediatrics，WuhanUniversity，RenminHospital，Wuhan430060，China Correspondingauthor：JiangYi．Email：jiangyiwd@126．com A【bstract】 Objective ToinvestigatetheeffectofAtorvastatinontheproliferationandapoptosisofleukemic HL一60一cellline，andtoexplorethepossibleroleofph0sphatidvlin0sitol3一 kinase／serine／threonineproteinkinase／ mammaliantargetofrapamycin(PI3K／AKT／mT0R)signalingpathwayinthisprocess．Methods HL一60cellswere incubatedwithdifferentconcentrationso