Nrf2基因敲除对小鼠蛛网膜下腔出血后小胶质细胞巨噬细胞活化的影响.pdfVIP

医学研究生学报2015年 1月 第28卷 第 l期 JMedPostgra，Vo1．28，No．1，January~2015 · 11 · 论 著 (基础研究) Wry2基 因敲除对小 鼠蛛网膜下腔出血后 小胶质细胞 ／巨噬细胞活化 的影响 李 桃 ，王汉东，丁 宇，何 进 ，丁 可，陆新宇，徐建国，韦武亭 【摘要】 目的 脑内小胶质细胞／巨噬细胞(microglia／macrophage，M／M)在蛛网膜下腔出血(subarachnoidhemor— rhage，SAH)脑组织损伤和修复中具有重要作用 。文中研究小 鼠SAH后 M／M活化及 m 基 因敲除对 M／M活化 的影 响。 方法 野生型 ICR小鼠70只，来源于 ICR的Nrf2基因敲除小鼠35只，采用小鼠视交叉注射 自体血建立 SAH模 型 。假手术组行同样抽血、钻孔及置针 ，但不行注血 。实验分为4组 ，野生型假手术组 、野生型 SAH组、基 因敲除假手 术组 、基 因敲除 SAH组。SAH术后第 1、3、5天取标本 ，用 Westernblot法和免疫组化法检测 M／M特异性蛋 白Ibal的表 达 ；同时Westernblot检测 SAH后第3天 Ibal蛋 白表达，免疫荧光染色检测 SAH后第 3天 CD16／32 Ibal细胞数量。 结果 Westernblot检测结果显示野生型假手术组 、野生型 SAH组第 1、3、5天 Ibal蛋 白表达灰度值分别为0．4914- 0．039、0．657-4-0．069、0．930±0．046和 0．926±0．046，而 Ibal蛋 白免疫组织化学染色平均光密度值为 0．412± 0．122、0．6254-0．135、0．963-40．213和0．978-40．224，野生型SAH组第 1、3、5天 Ibal蛋 白表达均较野生型假手术组 明显增加 (P0．05)，但野生型 SAH组第3天与第 5天 Ibal表达差异无统计学意义 (P0．05)；Westernblot结果示野 生型假手术组、基 因敲除假手术组、野生型 SAH组、基 因敲除 SAH组 SAH后第 3天 Ibal蛋 白表达灰度值分别为 1．157-40．080、1．162±0．073、1．5804-0．171和 1．913-40．220，CD16／32 Ibal 细胞数量分别为 0、0、30．200±6．300 和42．800±6．260(个 ／HP)，SAH后第 3天基 因敲除SAH组 Ibal蛋 白表达较野生型 SAH组增加 (P0．05)，且基因敲 除SAH组 CD16／32 Ibal 细胞数较野生型 SAH组明显增多 (P0．05)。 结论 小 鼠SAH后 M／M 活化增加 ，Ⅳ 基 因敲除促进 了SAH后 M／M 的活化和 M1极化。 【关键词】 蛛网膜下腔出血；Nrf2；小胶质细胞／巨噬细胞；活化；极化 【中图分类号】 R743 【文献标志码】 A [文章编号】 1008—8199(2015)01-0011-05 Nrf2deficiencypromotesmicroglia／macrophageactivationaftersubarachnoidhemorrhageinmice LITap ，WANGHan．dong，DINGYu ，HEJin ，DING Ke ，LUXin-yu ，XUJian—guo ，WEIWu．ring (1．DepartmentofNeurosurgery，2．DepartmentofAnesthesiology，finlingHospital，NanjingUniversitySchoolof Medicine／NanjingGeneralHospitalofNanjingMilitaryRegion，P ，Nanjing210002，Jiangsu，China) [Abstract] Objective Subarachnoidhemorrhage(SAH)isadevastatingdiseasewithhighfatalityandmorbidityandmicro—