肿瘤细胞冻存方法的探讨.pdfVIP

科学发展与社会责任 多态性等因素及是否有多次妊娠产生胎母免疫抗体有关。 有资料显示IgGA／B≥64的孕妇经中药治疗后，产前监测定量分析效价未见明显变化。并且血清学方 法查孕妇外周血不能确定胎儿血型，故在未采用其他方式进一步确诊时，中药治疗有一定的盲目性。应 用流式细胞术产前非侵入性测知胎儿血型，对于HDN的诊断和预防具有重要意义晦】，也是弥补血清学方 法不足的新技术。 参考文献 B 【1】1柳荣，陈世洁，张家骧．中国北方汉族Ao新生儿溶血病及其特点U】冲华儿科杂志，1986，24(1)：16 【2】吕鹏．最新输血技术学[M】．北京：人民卫生出版社，1994，383-422 【3】赵伟，李心春．输血反应与临床处理【M】．辽宁科学技术出版社，1996，387 P，DebbiaM，Puilhndre and anti—Dinmaternalsel-LlmandontheRBCsofinfants 【4】Lambin P，el：a1．IgGlIgG3 from the ofthe 537—1546 severitydiseaseⅡ】．Transfusion，2002，42(1 sufferingHDN：relationship谢th 2)：1 【5】5熊文，吴国光，喻琼，等．流式细胞术非侵入性检测胎儿血型的研究Ⅱ】．中国输血杂志，2002，15：378—378 作者简介 于沈阳中心血站，职称检验师，主要从事造血干细胞捐献者HLA基因分型、核酸检测、血型参比等工作。 肿瘤细胞冻存方法的探讨 曾 艳1 付 浩2 韦星呈1 师秀艳2 10034) (1．沈阳医学院医学基础部免疫学教研室；2．生物化学教研室邮编1 关键词：肿瘤细胞；瘤株；冻存 肿瘤细胞的培养是开发新的抗肿瘤新药的常规手段。肿瘤研究中移植性肿瘤又称瘤株传代也是最基本 的常用技术。瘤细胞培养后和瘤株建成后如何将细胞系和瘤株保存好是很值得探讨的。现将我们摸索出 一套简便易行、冻存效果好的肿瘤细胞冻存方法报道如下。 1．冷冻保存时间与肿瘤细胞存活率的关系 实验室得到一个新的肿瘤细胞株后，首先要把该肿瘤细胞株培养扩增后冻存起来。肿瘤细胞冻存可以 在由于污染等情况丢失细胞时有备份可用，另外，几乎所有肿瘤细胞在培养传代的过程中发生一定程度 的变异，为了保持实验结果的一致性，一般肿瘤细胞在培养几十代以后就不能使用了，因此需要将冻存 的、传代较少的肿瘤细胞复苏培养再使用。 冷冻保存温度指能长期保存细胞的超低温度，在此温度下，细胞生化反应极其缓慢甚至停止，但经过 长期保存，在复苏后仍能保持正常的结构和功能。不同的细胞和生物体以及使用不同的冷冻保存方法要 取得同样的冷冻保存效果，冷冻保存温度可以不同【1l。但从实际和效益的观点出发，液氮温度(一196。C)是 目前最佳的冷冻保存温度。在-196。C时，细胞的生命活动几乎完全停止，但复苏后细胞的结构和功能完 560 医药科学与生物技术 80。(2保存细胞，短 好。如果冷冻过程得当，一般生物样品在-196。(2下均可保存10年以上。应用～70。(2 期内对细胞的活性无明显影响，但随冻存时间延长，细胞存活率明显降低。在冰点到-400(2范围内保存细 胞的效果不佳团。 我们采用冷冻保存培养瘤细胞和瘤株已有近10年的经验，我们观察了已冻存的1年、2年、5年及8年以 上的瘤细胞和瘤株，不同冻存条件对其存活的影响，发现存放细胞并不是无限期的，在液氮中保存细胞 随着保存年数的增加，细胞存活率下降。5年时细胞存活率仅为40％～55％，所以每5年最好重新将种子细 胞复苏后扩增再冻存，以确保种子细胞的存活率。 2肿瘤细胞冻存方法的改进