抗菌肽基因表达系统研究进展.pdfVIP

《饲料工业》·2009 年第30 卷第7 期 营养研究 抗 菌 肽 基 因 表 达 系 统 研 究 进 展 唐 勇 摘 要 抗菌肽是生物体产生的一种阳离子短肽，具有天然的抗菌活性。由于抗菌肽具有与传统 抗生素不同的作用机制，不产生耐药性，因而具有重要的临床应用价值，可作为新型绿色、安全、环保 的饲料添加剂。但是怎样用廉价的方式大量地得到抗菌肽是对它进行深入研究和广泛应用的前提，基 因重组的方法可能是最经济的获得大量抗菌肽的方法，许多研究对不同来源的抗菌肽进行了重组表 达的尝试，涉及的表达系统包括大肠杆菌系统、酵母系统、昆虫系统。针对近年来抗菌肽开发的基因工 程策略和实践，尤其是大肠杆菌表达系统和酵母表达系统，文中进行了简要综述。 关键词 抗菌肽；基因表达；大肠杆菌；毕赤酵母 中图分类号 S816.15 抗菌肽(Antibacterial peptide) 是生物细胞特定基 同来源的抗菌肽进行了重组表达的尝试，涉及的表达 因编码、经特定外界条件诱导产生的一类多肽，具有 系统包括大肠杆菌系统、酵母系统等。 相对分子质量小、热稳定、杀菌范围广、作用机制独特 1 抗菌肽基因在大肠杆菌中的表达 等特点。 一般由20～60 个氨基酸残基组成，分子量约 1.1 大肠杆菌 为 其分布极其广泛，从细菌到植物、软体动 在过去的 年里 人们对大肠杆菌系统的遗传 2～7 kD, 20 , 物、两栖动物、鱼类、鸟类和哺乳动物体内都有其存 学、生物化学和分子生物学方面有了充分的认识 使之 , 在。 多数抗菌肽的等电点大于 呈现较强的阳离子特 成为表达许多外源蛋白的首选表达系统。 大肠杆菌遗 7, 征。 其水溶性好，耐热性能高， 加热 仍能 传图谱明确 易培养、周期短、费用低对许多蛋白质有 , , 100 ℃ 10 min 保持一定的活力。 抗菌肽对较大离子强度或较高、较 较强的耐受能力 能较高水平地表达多种蛋白。 所以大 , 低的 值环境都有较强的抗性。 由于抗菌肽本身所 肠杆菌是应用于 重组技术的主要宿主细菌。 pH DNA 具有的特点，它已经越来越多地作为一种潜在的抗菌 1.2 抗菌肽基因在大肠杆菌中的表达策略 药物引起了人们的兴趣，用廉价的方式大量地得到抗 1.2.1 密码子优化 菌肽是对它进行深入研究和广泛应用的前提。 稀有密码子在真核与原核细胞中对基因表达有 传统方法主要是用生物化学方法直接分离抗菌 着相似的影响，往往会显著降低抗菌肽基因的表达水 肽，再研究其结构特点与功能活性。 通过人工诱导内 平。 大肠杆菌基因对密码子的使用有相当程度偏爱 源性抗菌肽的表达，一般是注射抗原后通过获得组织 性，表现为在同一密码子家族中只有 1~2 个密码子被 匀浆，再进行分离纯化和活性研究。 但分离提纯具有 频繁使用， 大肠杆菌稀有密码子如编码Ser 的TCG 、 抗菌活性的组分无疑是一件非常繁琐的工作，且不同 ，编码 的 、 等