鸡传染性喉气管炎病毒的分离鉴定.pdfVIP

安徽农业科学，JournalofAnhuiA ．Sci．2009，37(26)：12572—12573，12581 责任编辑 常俊香 责任校对 泣伟 鸡传染性喉气管炎病毒的分离鉴定 周建强，潘琦，吴敏秋，周广生，陈长春 (江苏畜牧兽医职业技术学院，江苏泰州225300) 摘要 [目的]证实江都市存在鸡传染性喉气管炎。[方法]以江都市5只发病鸡的喉、气管粘膜及其分泌物为病料，采用鸡胚传代的方 法从中分离出1株病毒(Iuv—JD07)，对分离毒株进行了理化特性检验、毒价测定、中和试验、琼脂免疫扩散试验、PCR扩增及电泳检测 等。[结果]鸡胚接种病料后48h胚体活性减弱，3—8d内死亡6枚，解剖死胚可见其绒毛尿囊膜(CAM)增厚，取病变CAM传至第4代 接种鸡胚，鸡胚集中于接种后3—5d内死亡；第4代分离毒的毒价基本稳定在 105EID ／0．2ml，分离毒毒株可被鸡传染性喉气管炎 (ILT)标准阳性血清中和，中和价为l：54；参考株ILT／13与分离株ILTV-JtX97均可扩增出l务ll83bp的DNA条带。[结论]江都市存 在鸡传染性喉气管炎。 关键词 IUV；分离；鉴定 中图分类号 s858．31 文献标识码 A 文章编号 o517—661l(2OO9)26—12572—02 Isolation andIdentificationofInfectiousLaryngotracheitisVirusofChicken 珊 0UJian-qiangetal (JiangsuVocationalTechnicalCollegeofAnimalHusbandryandVeterinary，Taizhou，Jiangsu225300) Abstract [Objective]1’IlcstudywastoconfirmetheexistenceofinfectiouslaryngotracheifisofchickeninJiangduCity．[Mehtod]Wihthte larynx．tracheamucosaanditssecretionof5diseasedchickenfromJiangduCit,／asthesamples，lstrainofvirus(IL1 J·D07)wasioslated bvSPFchickenembryoculture．thephysicocbemicalpropertyoftheisolatedstrainwlit8tested，and viurstiterwasdetermined．Atthe8anle timetheneutralizationtest．agarimmunodiffusiontest．peramplificationnadelectrophoresisdetectionontl1estrainwereconducted．【Result】 Theactivitiesofchickenembryoswakenedafter48hoftheywere inoculatedwithhteasmple．and6embryosdiedin3—8dafterinoculation． Thechorioallantoicmembrane(CAM)fromhtedeadembryothickened．Whenthe4htgenerationofdiesaesdCAMwasinoculatedintochicken embryos．htechickenembryoscenrtalizelydiedin3—5dafterinoculation．Th eviurstiterofhte4thgenerationoftheisolatedviurswasstable at10 EID ／0．2m1．TheioslatedstraincouldbeneutralizedbytIlestandardpositiveesrulnofinfectiouslaryngotracheitisviursofchicken (ILT)，anditsneutralizationtiterw8s1：54．There~crencesrtainsILT／13nadhteisolatedstrainIL1-[v．JD07allcouldamplifiedlDNAband whichlengthwas1183bp．[Conclusion]TheinfectiouslaryngotracheitisofchickenwasexistedinJinagduCity． Keywor